جداسازي مايكوپلاسما آگالاكتيه با دو روش كشت و واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) در گوسفندان مبتلا به بيماري آگالاكسي واگير در شهرستان بافت

Detection of Mycoplasma agalactiae by culture and Polymerase Chain Reaction (PCR) methods from affected sheep to contagious agalactiae in Baft County

مايكوپلاسما آگالاكتيه بعنوان مهمترين عامل بيماري آگالاكسي واگيردار در بسياري از كشورهاي مديترانه و خاورميانه از جمله در ايران مطرح است. دام هاي مبتلا معمولا دچار عفونت پستان همراه با قطع ناگهاني شير، تورم مفاصل، التهاب ملتحمه ي چشم، لاغري و ضعف عمومي مي شوند كه سبب خسارات اقتصادي شديد به دامداران مي گردد. هدف از اين تحقيق جداسازي و شناسايي مايكوپلاسما آگالاكتيه با استفاده از دو روش كشت و PCR در گوسفندان مشكوك به بيماري آگالاكسي در شهرستان بافت در سال 1388بود. اين بررسي به مدت يكسال در چهار فصل مختلف در گوسفندان شهرستان بافت انجام شد. از گله هاي مشكوك نمونه گيري هدف دار بعمل آمده و نمونه ها شامل شير، سوآب چشم و پانكسيون مايع مفصلي با دو روش كشت در محيط اختصاصي PPLO و PCR با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي در ناحيه ژن 16S rRNA و ژن ليپوپروتيين، جهت جداسازي و شناسايي مايكوپلاسما آگالاكتيه مورد ارزيابي قرار گرفتند. در روش كشت از مجموع 17 نمونه ي اخذ شده، در 8 نمونه پرگنه-هاي بشكل تخم مرغ نيمرو مشاهده گرديد و بعنوان مايكوپلاسما شناسايي شد و با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي در آزمايش PCR بعنوان جنس مايكوپلاسما مورد تاييد قرار گرفتند. در روش PCR نيز در 8 نمونه جنس مايكوپلاسما جداسازي شد و تنها يك نمونه بعنوان مايكوپلاسما آگالاكتيه مورد شناسايي قرار گرفت. اين اولين گزارش از جداسازي مايكوپلاسما آگالاكتيه از گوسفندان مبتلا به بيماري آگالاكسي با استفاده از دو روش كشت و PCR در ايران است. اين مطالعه نشان داد 5/87 درصد از عوامل بيماري آگالاكسي در شهرستان بافت را گونه يا گونه هاي ديگر مايكوپلاسما تشكيل مي دهند.

Mycoplasma agalactiae is the etiological agent of contagious agalactia that is a serious disease affecting sheep and goat. It occurs mainly in Mediterranean country and western Asia including Iran. It is characterized by mastitis and decline and subsequent failure of milk production, arthritis, keratoconjuctivitis and in appetence. The aim of the study was to detection of Mycoplasma agalactiae by culture and PCR method from affected sheep in Baft. This survey was on all sheep and consume 1 year in 4 seasons in Baft. Dubious herds were under purposive sampling and samples were including milk secretion, conjunctival swab and synovial fluid. These samples enriched in PPLO broth media and for Mycoplasma species detection cultured in PPLO agar media and were characterized by amplification of 16S ribosomal RNA genes showed specific amplicon at 163 bp in PCR method. Positive specimens examined for M. agalactiae detection by amplification of lipoprotein gene that showed specific amplicon at 375 bp. From 17 samples, 8 Mycoplasma species identify that at one sample M. agalactiae species detected and M. agalactiae confirmed in 12.5 percent of Mycoplasma samples. This is the first report of M. agalactiae detection from affected sheep by two methods: culture and PCR method in Iranian sheep. This study shown 87.5 percent of contagious agalactia agents in Baft County are related to other species. However, in different sources main agent of 90 percent of this infection was M. agalactiae species.