توزيع فراواني عوامل باكتريايي در شيره صفراوي بيماران مبتلا به سنگ و ساير بيماريهاي صفراوي

The Frequency of Bacterial Agents in the Bile Juice of Patients with Bile Stones and Biliary Disorders

چكيده زمينه و هدف : صفرا در افراد سالم استريل و فاقد هر گونه باكتري مي باشد و وجود ميكرو ارگانيسم ها در صفراي انسان مي تواند نشانه اي از وجود يك مشكل باليني باشد كه در اغلب موارد با بيماري كوله ليتيازيس (cholelithiasis) مرتبط است. هدف از مطالعه حاضر بررسي توزيع فراواني باكتري هاي موجود در نمونه مجاري صفراوي بيماران مبتلا به سنگ هاي دستگاه صفراوي و بيماري هاي بدخيم دستگاه پانكراسي – صفراوي مي باشد. روش بررسي: طي 6 ماهه دوم سال1390، 102 نمونه مايع صفراوي به روش اندوسكوپيك كولانژيوپانكراتوگرافي معكوس(ERCP) از بيماران مراجعه كننده به بيمارستان طالقاني دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي جمع آوري گرديد. ابتدا اطلاعات باليني بيماران، نوع سنگ و بيماري هاي زمينه اي مورد بررسي قرار گرفت، در ادامه بررسي هاي ميكروب شناسي مانند كشت، شمارش تعداد و تعيين هويت باكتري ها، تست هاي حساسيت دارويي و تست هاي مولكولي تاييدي ((16S rDNA PCR بر روي تمامي نمونه ها انجام گرديد و ارتباط هاي آماري با استفاده از نرم افزار SPSS version 13 در پايان مورد ارزيابي قرار داده شد. وجود شمارش بيش از هزار باكتري در هر نمونه بعنوان شاهدي بر كلنيزاسيون پايدار در نظر گرفته شد. يافته ها : از ميان(41.1%)42 نمونه كشت مثبت، 59 جدايه باكتريايي با استفاده از روش كشت جداسازي گرديد، به علاوه در 7 نمونه از ميان نمونه هاي كشت منفي نيز حضور DNAباكتريايي توسط روش مولكولي نشان داده شد. بيشترين نوع سنگ ها به ترتيب مربوط به سنگ كلسترولي ، پيگمانته سياه و پيگمانته قهوه اي و بيشترين ايزوله هاي جداسازي شده در اين بيماران باكتري هاي اشرشيا كلي(34.4%)، انتروكوكوس(19.7%)، كلبسيلا پنومونيه (18%) و سودوموناس ايروژينوزا(18%) بودند. بين نوع سنگ، نوع باكتري كشت شده و بيماري هاي تحت بررسي در اين بيماران ارتباط معناداري ديده نشد. داشتن سابقه مصرف آنتي بيوتيك در اين بيماران مبتلا يه سنگ صفراوي(44.6%) بطور معنادار بيش از ساير مشكلات صفراوي بود((P=0.01. نتيجه گيري : وجود باكتري در 41.1% نمونه هاي صفراوي مي تواند دليلي بر نقش آنها در پاتوژنز بيماريهاي صفراوي باشد. اشرشيا كلي و انتروكوكها از شايعترين اين عوامل مي باشند. مطالعه بيشتر بر روي توان بيماريزايي و اثرات پاتوفيزيولوژيك اين باكتري ها خواهد توانست به روشن تر شدن نقش باكتري ها در ايجاد سنگهاي صفراوي كمك نمايد. واژه هاي كليدي: سنگ هاي صفراوي، باكتري، ERCP، آنتي بيوتيك

Abstract Background and objectives: Bile in healthy people is a sterile fluid and presence of any microorganism can be a marker for a disorder like cholelithiasis. The aim of this study was to determine the frequency of bacterial agents in the bile of patients with bilestone, malignant pancreatic and biliary diseases. Material and Methods: One hundred and two bile samples were obtained, during six months in 2011, from patients subjected to ERCP in Taleghani hospital, Tehran. First, Patientʹs clinical data, the type stone, and their disease status were studied, and then the microbiological investigations, such as culture, identification of the bacteria and detection of their counts, drug susceptibility testing and molecular tests (16s rDNA PCR) performed on all the samples. Higher than 103 bacteria counts for each sample, in the absence of underlying infections, was considered as stable colonization. We run SPSS version 13 to analyze the data. Results: Out of 42(41.1%) positive bile culture samples, 59 bacterial isolates are detected by conventional methods. Of culture negative samples, seven have bacterial DNA indicated by PCR method. The most isolated bacteria are E. coli (%34.4), Enterococcus spp. (%19.7), Klebsiella pneumoniae (%18) and Pseudomonas aeruginos (18%). The most frequent stones are cholesterol, black pigment and brown pigment, respectively. There is no significant association between the diseases, stones and types of bacteria. Previous antibiotic usage (44.6%) is meaningfully more than that of other biliary problems (p=0.01). Conclusion: The presence of bacteria, Escherchi coli and Entrococcus which are the most in bile samples, is considered as a risk factor in pathogenesis of biliary disorders. Further studies on the pathogenesis and pathophysiological effects of bacteria can help us to clarify the role of bacteria in producing bile stones. Key words: Bile stones, Bacteria, ERCP, Antibiotics.