بررسي فنوتيپي و مولكولي بتالاكتامازهاي وسيع الطيف PER در ايزوله‌هاي ادراري انتروباكترياسه در مشهد

Phenotypic and molecular detection of PER extended spectrum B-lactamases in urinary Enterobacteriaceae isolates in Mashhad

زمينه و هدف: توليد آنزيم‌هاي بتالاكتاماز توسط باكتري‌ها به‌ويژه نوع Extended Spectrum B-Lactamase (ESBL) يكي از مشكلات بهداشتي و درماني در سطح دنياست. شيوع اين آنزيم‌ها در نواحي جغرافيايي مختلف و با زمان تغيير مي‌كند. هدف از انجام اين تحقيق، تعيين شيوع باكتري‌‌هاي مولد بتالاكتاماز وسيع الطيف در ميان ايزوله‌هاي ادراري انتروباكترياسه و رديابي ژن blaPER در دو بيمارستان منتخب مشهد بوده است. مواد و روش كار: در اين مطالعه‌ي توصيفي مقطعي، تعداد 100 ايزوله انتروباكترياسه از نمونه‌هاي ادراري بيماران بستري و سرپايي بيمارستان‌هاي قايم و 17 شهريور مشهد از تاريخ 15/8/ 1389 تا 15/10/1389 جمع‌آوري و با آزمايشات بيوشيميايي- افتراقي شناسايي شدند. ايزوله‌ها از نظر حساسيت به آنتي‌بيوتيك ها آزمايش شدند. سپس از نظر توليد ESBL به وسيله‌ي آزمايش ديسك دوتايي و آزمايش تاييدي مطابق دستورالعملCLSI (Clinical and Laboratory Standard Institute) مورد بررسي قرار گرفتند. شناسايي مولكولي ژن blaPER با استفاده از پرايمر اختصاصي و تكنيك واكنش زنجيره پليمراز انجام شد. يافته ها: از 100 باكتري جدا شده، تعداد 27 ايزوله (27%) مولد بتالاكتاماز بودند كه همگي فاقد ژن blaPER روي پلاسميد بودند. مقاومت باكتري‌هاي مولد بتالاكتاماز نسبت به آمپي سيلين، سفوتاكسيم، سفتازيديم و سفالوتين بيشتر از انواع فاقد بتالاكتاماز بود (05/0 < p). درصد بيشتري از اين باكتري ها در مقايسه با انواع فاقد بتالاكتاماز مقاوم به آنتي بيوتيك هاي غير بتالاكتام جنتامايسين، كوتريموكسازول و نيتروفورانتويين بودند كه اختلاف براي جنتامايسين و كوتريموكسازول معني دار بود (05/0p < ). نتيجه‌گيري: نتايج نشان مي دهد كه توليد بتالاكتاماز در باكتري‌‌هاي جدا شده در جامعه‌ي مورد بررسي شيوع نسبتا" بالايي دارد. ژن blaPER در ميان باكتري هاي جدا شده يافت نشد، بنابراين توليد بتالاكتاماز در ميان اين ايزوله ها مربوط به ساير انواع بتالاكتاماز است.

Background & Objectives: Production of B -lactamases especially extended spectrum B -lactamases (ESBLs) by bacteria is one of the emerging health problems in the world. The prevalence of these enzymes varies greatly within different geographical areas and is changing over time. The purpose of this study was to determine the prevalence of ESBL producing bacteria among the urinary Enterobacteriaceae isolates and detection of blaPER gene from two selected hospitals in Mashhad. Material & Methods: In this cross-sectional study, 100 Enterobacteriaceae isolates were collected from urine samples of inpatient and outpatient referred to 17-Shahrivar and Qaem hospitals from November 2010 to January 2011. Bacteria were identified by differential biochemical tests. Isolated bacteria were evaluated for antibiotic susceptibility. Double-disk approximation and phenotypic confirmation tests of ESBL production were performed according to CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) guidelines. Molecular detection of blaPER gene was carried out by polymerase chain reaction using specific primers. Results: Out of 100 bacterial isolates, 27 (27%) were ESBL producers without plasmid mediated blaPER. gene. Resistance to ampicillin, cefotaxime, ceftazidime and cephalothin among ESBL producing isolates was higher than non-producers (p < 0.05). ESBL producers in comparison with non-producers were resistant to gentamicin, co-trimoxazole, and nitrofurantoin and there was significant difference for resistance to gentamicin and co-trimoxazole (p < 0.05). Conclusion: Results shows that ESBL production among Enterobacteriaceae isolates in the studied community is relatively high; blaPER gene was not found among isolated strain; therefore, production of B-lactamase is related to other types of ESBLs among isolated Entrobacteriaceae.