بررسي اثر تزريق سلول‏هاي بنيادي مزاشيمي جدا شده از بافت چربي و محيط رويي كشت اين سلول‏ها بر ارتشاح لكوسيتي مغز موش‏هاي مبتلا به آنسفالوميليت خودايمن تجربي

Study of the Effects of Adipose-tissue Mesenchymal Stem Cells and Conditioned Medium on Cell Infiltration in the Brains of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis C57 BL/6 Mice

هدف: بررسي اثر تزريق سلول‏هاي بنيادي مزاشيمي جدا شده از بافت چربي و محيط رويي كشت اين سلول‏ها بر ارتشاح لكوسيتي مغز موش‏هاي مبتلا به آنسفالوميليت خود‏ايمن تجربي مواد و روش‏ها: در 20 سر موش ماده C57BL/6 مدل آنسفالوميليت خودايمن تجربي القا و سپس موش‏ها به چهار گروه پنج‏تايي تقسيم شدند و پس از 15 روز، زماني كه تقريباً شدت باليني علايم به يك رسيد، به دو گروه از موش‏ها 106 عدد سلول بنيادي مزانشيمي جدا شده از بافت چربي موش C57BL/6به‏صورت درون‏رگي و 106×2 عدد سلول بنيادي مزانشيمي جدا شده از بافت چربي به درون صفاق و به يك گروه از آن‏ها 6 نوبت محيط رويي كشت سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي و هر نوبت يك سي‏سي به‏صورت درون صفاقي تزريق شد. يك گروه از موش‏ها نيز بدون هيچ تيماري به‏عنوان گروه كنترل باقي ماند. پس از 60 روز اثر سلول‏ها و محيط رويي كشت اين سلول‏ها بر ارتشاح لوكوسيتي مغز در چهار گروه با هم مقايسه شد. نتايج: ارتشاح لوكوسيتي در گروه‏هايي كه سلول بنيادي مزانشيمي و محيط رويي كشت سلول‏هاي مزانشيمي را دريافت كرده بودند در مقايسه با گروه كنترل آنسفالوميليت خود‏ايمن تجربي كه هيچ تيماري دريافت نكرده بود، كاهش معني‏داري نشان داد (P < 0.05). وزن و ميزان بقاي موش‏هاي تيمار شده در مقايسه با گروه كنترل افزايش داشت. نتيجه‏گيري: سلول‏هاي بنيادي مزانشيمي جدا شده از چربي خواص تنظيمي ايمني و ترميم بافت عصبي دارند كه مي‏تواند سبب بهبود موش‏هاي مبتلا به آنسفالوميليت خودايمن تجربي در مقايسه با گروه كنترل شود.

Objective: This study investigated the effects of adipose-derived mesenchymal stem cells (MSCs) and conditioned medium injection on cell infiltration in the brains of an experimental C57BL/6 mice model of autoimmune encephalomyelitis (EAE). Methods: EAE was induced with myelin oligodendrocyte glycoprotein (35-55 peptides) in 20 mice. MSCs were obtained from the adipose tissue of C57BL/6 mice and cultured with Eagle’s minimum essential medium/alpha medium (DMEM) after removal of non-adherent cells. After 2 to 3 passages, 15 days after induction of EAE, 4 groups (n=5) of C57BL/6 mice were treated as follows: i) MSCs were injected intraperitoneally, ii) MSCs were injected intravenously, iii) conditioned medium was administrated intraperitoneally, and iv) the control group received no treatment. After day 60, the mice brains were removed and the effect of adipose-tissue MSCs and administration of conditioned medium was investigated. Results: Leukocyte infiltration and clinical scores were significantly reduced in animals that received MSC and conditioned medium compared to untreated animals. Body weight increased significantly in the treated groups compared to the control group. Percentage of survival also increased in the animals that received MSCs and conditioned medium as compared to the control group. Conclusion: MSCs had immunomodulatory and neurogenerative functions which reduced leukocyte infiltration and improved clinical scores in the EAE animals that received MSC and conditioned medium compared to untreated animals with EAE.