عنوان مقاله :
شناسايي پروتيين هاي موجود در فيلتراي كشت مايكوباكتريوم توبركلوزيس سويه DT و مقايسه ي آن با پروتيين هاي توبركولين انساني توسط روش هاي الكتروفورتيك
عنوان فرعي :
The Identification of proteins present in culture filtrare of Mycobacterium tuberculosis DT and comparison with human tuberculin proteins by electrophoretic methods
پديد آورندگان :
صادقي، داود نويسنده كارشناس ارشد بيوفيزيك ، دانشگاه آزاد اسلامي ، واحد علوم و تحقيقات تهران ، گروه زيست شناسي ، Sadeghi, D , مصوري ، نادر نويسنده , , رفيعي، بهنام نويسنده كارشناس ارشد ميكروبيولوژي ، گروه ميكروبيولوژي Rafiee , B , محمد طاهري، محمد نويسنده كارشناس ارشد باكتري ، Mohamad Taheri , M , دشتي پور، شجاعت نويسنده كارشناس علوم آزمايشگاهي ، Dashtipour, Sh , زارع، عباس نويسنده دانشيار بيوشيمي ، Zare, A , قهرمانلو، عزت الله نويسنده , , تبيانيان، مجيد نويسنده همتراز ايمني شناسي ، Tebyanian, M
اطلاعات موجودي :
فصلنامه سال 1391
كليدواژه :
توبركولين , SDS-PAGE , مايكوباكتريوم توبركلوزيس
چكيده فارسي :
چكيده
زمينه و هدف : توبركولين حاوي پروتيين هاي موجود در محيط كشت باكتري سل مي باشد كه توسط تري كلرواستيك اسيد(TCA) و يا آمونيوم سولفات رسوب داده شده اند و جهت تشخيص آلودگي به باكتري سل از آن استفاده مي شود. هدف از انجام اين مطالعه مقايسه ي توبركولين انساني توليدي در موسسه سرم سازي رازي با پروتيين هاي موجود در فيلتراي كشت مايكوباكتريوم توبركلوزيس مي باشد.
روش بررسي: ابتدا باكتري از محيط كشت جامد لونشتاين جانسون توسط محيط دوفازي به محيط مايع دورس هنلي منتقل شد و پس از رشد آن به مدت 6 هفته ، باكتري ها توسط فيلتر 22/0 ميكرون از محيط كشت مايع حاوي پروتيين هاي ترشحي جدا شدند. سپس محلول حاوي پروتيين هاي ترشحي به صورت جداگانه توسط TCA و سولفات آمونيوم ترسيب شدند. سپس توسط اسپكتروفوتومتر و پروتيين سنجي كجلدال، وجود پروتيين در نمونه هاي ترسيب شده تاييد گرديد. در انتها پروتيين هاي ترسيب شده توسطSDS-PAGE و رنگ آميزي كوماسي بلو با توبركولين انساني استاندارد مقايسه شدند.
يافته ها: نمونه ترسيب شده با TCA داراي باندهاي بيشتري در محدوده ي بالاتر از 20 كيلودالتون بود، در حالي كه نمونه ترسيب شده با سولفات آمونيوم داراي باندهاي بيشتري در محدوده ي پايين تر از 20 بود. همچنين پروتيين هاي توبركولين انساني نيز بصورت اسمير و داراي وزن كمتر از 16 كيلودالتون بودند.
نتيجه گيري: نتايج ما نشان داد كه سولفات آمونيوم نسبت به TCA، ترسيب كننده اي مناسب تر براي پروتيين هاي با وزن مولكولي پايين باشد.
واژه هاي كليدي: مايكوباكتريوم توبركلوزيس،SDS-PAGE ، توبركولين
چكيده لاتين :
Abstract
Background and objectives: Tuberculin is the proteins existed in tuberculosis culture medium which precipitated by trichloroacetic acid (TCA) or ammonium sulfate. Tuberculin is used for diagnosis of Tuberculosis. The aim of this study is to compare the human tuberculin produced by Razi Institute and Mycobacterium tuberculosis Culture Filtrate Protein.
Material and Methods: Initially By biphasic medium, Bacteria from Lowenstein–Jensen solid medium was transferred to a Dorset?Henley Liquid medium. After 6 weeks of growth, the bacteria were isolated from liquid medium containing secretory proteins by the 0, 22 micron filter and the solution containing secretory proteins was precipitated by TCA and ammonium sulfate, separately. Then, using spectrophotometer and kjeldahl protein assay, the presence of protein in solution was confirmed. At the end, the precipitated proteins are compared with the human tuberculin by Coomassie-Blue stained SDS-PAGE
Results: The protein samples precipitated by TCA have more bands in the limit of higher than 20 kDa, but the protein samples by ammonium sulfate have more bands in the limit of less than 20 kDa. Human tuberculin proteins are like smear and their weight is less than 16 kDa.
Conclusion: It seems that ammonium sulfate is more suitable for low molecular weight proteins than TCA for precipitation.
Key words: Mycobacterium tuberculosis, SDS-PAGE, tuberculin
عنوان نشريه :
علوم آزمايشگاهي
عنوان نشريه :
علوم آزمايشگاهي
اطلاعات موجودي :
فصلنامه با شماره پیاپی سال 1391
كلمات كليدي :
#تست#آزمون###امتحان
