كربوهيدرازهاي گوارشي در لارو كرم خراط Zeuzera pyrina (Lep.: Cossidae)

Digestive Carbohydrases in the Larva of the Leopard Moth, Zeuzera pyrina (Lep.: Cossidae)

كرم خراط يك آفت كليدي است كه به درختان نارون و برخي درختان ميوه در مرحله لاروي خسارت وارد مي كند. روده مياني لارو در زير استريوميكروسكوپ جدا شد و به عنوان منبع آنزيمي مورد استفاده قرار گرفت. اپتيمم فعاليت آلفا-آميلاز، آلفا-گلوكوزيداز و بتا-گلوكوزيداز استخراج شده از روده مياني لارو به ترتيب در pH هاي 8، 6 و 6 بدست آمد. دماي بهينه براي فعاليت آلفا-آميلاز، آلفا-گلوكوزيداز و بتا-گلوكوزيداز به ترتيب 40، 35و 35 درجه سلسيوس حاصل شد. در بررسي پايداري آنزيم ها، آلفا-آميلاز در گستره pHهاي 7 تا 9 بيشترين پايداري را نسبت به pHهاي خيلي اسيدي و يا خيلي قليايي داشت. بيشينه ي پايداري آلفا-گلوكوزيداز و بتا-گلوكوزيداز ازpH 6 تا 8 بدست آمد. هر چند كه بيشترين پايداري آنزيم هاي مربوطه به ترتيب 8 براي آلفا-آميلاز و 6 براي آلفا-گلوكوزيداز و بتا-گلوكوزيداز مي باشد. يون هاي كلسيم و سديم دودسيل سولفات (SDS) موجب كاهش فعاليت آنزيم هاي بتا-گلوكوزيداز شد. در حالي كه كلسيم موجب كاهش آلفا-گلوكوزيداز شد. پتاسيم و سديم اثر معني داري روي فعاليت بتا-گلوكوزيداز نداشت اما روي آلفا-گلوكوزيداز كمي اثر افزايشي داشت. SDS در ابتدا موجب افزايش و در غلظت نهايي موجب كاهش فعاليت آلفا-گلوكوزيداز شد. كلسيم و پتاسيم موجب افزايش فعاليت آلفا-آميلاز شد و SDS هم موجب كاهش فعاليت اين آنزيم گشت. بررسي‌هاي زايموگرام هم وجود دو باند براي آلفا-آميلاز و 1 باند براي آلفا-گلوكوزيداز و بتا-گلوكوزيداز را به اثبات رساند. اميد است يافته هاي اين مقاله كمك شاياني را براي طرح ريزي استراتژي هاي كنترلي سالم همانند ايجاد گياهان تراريخته مقاوم فراهم آورد.

The leopard moth, Zeuzera pyrina, is a key and worldwide pest damaging walnut as well as many other fruit trees during the larval stages. Larvae were collected from infested twigs of walnut trees. Midguts from larvae were removed under a stereomicroscope and their homogenates used as the enzyme source. Larval midgut extracts showed an optimum activity at pH 8.0, 6.0 and 6.0 for ?-amylase, ?- and B-glucosidase respectively. Optimal temperatures for ?-amylase, ?- and B-glucosidase activity were determined to be 35, 35 and 40 ?C respectively. ?-Amylase, ?- and B-glucosidase were respectively more stable at pHs 7.0-9.0, 6.0-8.0 and 6.0-8.0. However, the enzymes showed to be more stable at pH 8.0 (?-amylase) and 6.0 (?- and B-glucosidase). B-Glucosidase activity significantly decreased in the presence of Ca2+, and sodium dodecyl sulfate (SDS). Ca2+ decreased activity of ?-glucosidase as well. The ions K+ and Na+ did not significantly affect the B-glucosidase activity but increased the activity of ?-glucosidase. SDS decreased ?-glucosidase activity at higher concentrations. Ca2+ and K+ significantly increased the activity of ?-amylase. SDS significantly affected ?-amylase activity. PAGE-substrate experiments on larval midgut extract showed two bands of ?-amylase and one band of each ?- and B-glucosidase activity. It is hoped that these findings help to plan strategies for creating transgenic plants resistant to provide the healthy controls.