تشخيص ميكرومتاستاز با ماركر MUC2 در نمونه‌هاي خون و مغز استخوان بيماران سرطان پستان با روش Real –Time PCR

The Detection Of Micrometastases In Peripheral Blood And Bone Marrow Of Breast Cancer Patients Using Marker(MUC2) Real Time PCR

زمينه و هدف: گسترش تومور از طريق سيستم گردش خون به اندامهاي دورتر مهم‌ترين دليل مرگ در بيماران سرطان پستان مي‌باشد، در نتيجه نياز فوري براي ايجاد روشهاي حساس جهت تشخيص سلولهاي توموري در خون محيطي(PB) Peripheral blood و مغز استخوان Bone marrow(BM)بيماران وجود دارد. هدف از اين مطالعه تشخيص ميكرومتاستاز با استفاده از ماركر MUC2 در اين بيماران مي‌باشد. روش بررسي: اين بررسي نمونه‌هايPB و BM، 50 بيمار پس از جراحي و قبل از درمان اوليه جمع آوري شد. از موسين2(MUC2) به عنوان تومور ماركر استفاده شد.Real–Time PCR براي سنجشMUC2 با استفاده از سايبر گرين(SYBR Green) انجام گرفت. 20 نمونهPB از افراد سالم به عنوان كنترل جمع آوري گرديد. از HPRT به عنوان ژن كنترل داخلي استفاده شد. يافته‌ها: MUC2 در 8(%16) نمونه‌هاي PB و BMافراد مبتلا تشخيص داده شد. در نمونه‌هاي كنترل MUC2 مثبت نبود. همچنين ارتباط مثبت بودنMUC2 با عود بيماري بررسي شد. در بيماراني كه عود در آنها مشاهده شده است درصد مثبت بودن اين تومور ماركر نسبت به بيماراني كه عود در آنان گزارش نشده است بيشتر مي‌باشد. بين مثبت بودن MUC2و عود بيماري ارتباط معني داري از نظر آماري در BM به دست آمد(05/0P < ). نتيجه‌گيري:. اين مطالعه نشان داد كه MUC2 مي‌تواند به عنوان تومور ماركر مناسب جهت تشخيص ميكرو متاستاز در مراحل اوليه بيماري و همچنين پيش بيني عود استفاده شود.

Background and Aim: Tumor dissemination via blood to distant organs is the main cause of death. Therefore, there is a critical need to set up sensitive methods for the early detection of circulating tumor cells(CTCs) and disseminated tumor cells(DTCs) in peripheral blood (PB) and bone marrow(BM) specimens of breast cancer patients. The aim of this research is to study the detection of micrometastasis using MUC2 in such patients. Materials and Methods: In this study, PB and BM samples were collected from 50 breast cancer patients after operation and before adjuvant therapy. Mucin 2 (MUC2) was used as a tumor marker and its transcript level in the sample patients was analyzed using gene specific, quantitative real-time PCR reaction with SYBR Green technology. Samples from 20 healthy individuals were used as negative controls. HPRT was used as a reference gene. Results: MUC2 mRNA was detected in 8 (16%) of PB and BM samples. MUC2 mRNA was not detected in PB samples of healthy individuals. The relapse rate among MUC2-positive patients was higher than MUC2-negative patients; and it was statistically significant in BM (P < 0.05). Conclusion: This study shows that MUC2 can be a suitable marker for the detection of micrometastasis in breast cancer patients at early stages of cancer and that it may provide the basis for identifying women at risk of relapse. Key words: Tumor Cells, MUC2, RT-PCR