مطالعه اعتبار نتايج اليزاي خانگي و به دست آوردن بهترين نقطه برش

Validation of a domestic ELISA and determination of the best cut off point for seroepidemiological study of enzootic bovine leukosis

مطالعه حاضر به منظور مقايسه اعتبار يك اليزاي خانگي با يك اليزاي تجاري براي به دست آوردن بهترين نقطه برش به منظور تشخيص آنتي‌بادي‌هاي ضد ويروس لكوز گاوي (BLV) صورت گرفت. پروتيين‌هاي ويروس لكوز گاوي به راحتي از طريق روشي كه توسط سازمان مبارزه با بيماري‌هاي واگير دام ارايه شده است، استخراج شد. براي طراحي اليزاي خانگي از روش چكر بورد استفاده شد. 454 سرم از گاوداري‌ها تهيه و در يك اليزاي تجاري كه در اين مطالعه به عنوان آزمايش مرجع در نظر گرفته شده است مورد آزمايش قرار گرفتند و سپس نتايج آن‌ها با نتايج اليزاي خانگي مقايسه شدند. تمامي سرم‌هاي كنترل منفي به جز يكي (سرم استاندارد اروپايي براي پايش پاسخ سرمي به ويروس لكوز گاو، E5) از طريق اليزاي تجاري انتخاب شد. تجزيه و تحليل آماري سرم‌هاي كنترل منفي نشان از آن دارد كه با در نظر گرفتن نقاط برش از 26/0 تا 30/0 مقادير قابل قبولي از حساسيت و ويژگي نسبي به دست مي‌آيد لذا در اين فاصله خطر رخداد موارد مثبت كاذب در اليزاي خانگي كاهش مي‌يابد. بهترين حساسيت (86 درصد) و ويژگي (88 درصد) نسبي با در نظر گرفتن جذب نوري 27/0 حاصل مي‌گردد. فراواني پاسخ سرمي مثبت در ميان حيوانات مورد آزمايش به ترتيب 8 درصد و 10 درصد با اليزاي خانگي و اليزاي تجاري محاسبه گرديد.

The aim of this study was to compare the validation of a Domestic Indirect-ELISA with a Commercial Indirect-ELISA in order to find the optimum cut off value for detection of antibodies to Bovine Leukemia Virus (BLV). BLV proteins harvested easily as described by OIE and used in DI-ELISA. A domestic ELISA was adapted by checker board methods. 460 sera from different herds were applied in the commercial ELISA as a reference test and then compared with the domestic ELISA. All the negative control sera except one (E05 serum) were chosen by commercial ELISA. Statistical analysis of negative sera showed that consideration of a cut off value, from 0.26 to 0.30 will provide acceptable relative specifity, relative sensitivity and can reducing the risk of false positive results for Domestic Indirect ELISA. The best relative sensitivity (86%) and specifity (88%) was yielded in 0.27 optical density (OD). As calculated, frequency of seropositive animals was 8% and 10% by domestic and commercial ELISA respectively.