بررسي آثار پاتولوژيك و زمان ماندگاري ويروس تب برفكي در اندام‌هاي خوكچه هندي

Pathologic study and time of persistence foot-and-mouth disease in guinea pig organs

جهت عادت پذيري به ويروس تب برفكي در دوره هاي زماني متفاوت به10 سر خوكچه هندي در كف پاي آنها به روش داخل پوستي تزريق گرديد . بعد از ديدن علايم دال بر عمومي شدن و تهيه ويروس عادت داده شده به حيوان ، 30 سر خوكچه هندي ديگر را به 5 گروه شش تايي تقسيم نموده كه در هر گروه به پنج خوكچه ويروس عادت داده شده و به يك خوكچه به عنوان شاهد سرم فيزيولوژي تزريق شد . در ادامه در روز هاي دوم ، چهارم ، چهاردهم ، يك ماه و دو ماه پس از ديدن علايم عمومي شدن ويروس در بدن حيوان به روش انساني كشته شده و نمونه ها از ارگان‌هاي مختلف شامل : قلب ، ريه ، كبد ، طحال ، لوزه المعده ، اپي تليوم كف پا ، عقده لنفي پشت حلقي ، اپي تليوم زبان، عقده لنفي مغابني برداشت شد كه بخشي از نمونه ها جهت بررسي آسيب شناسي بعد از ثبوت در فرمالين وتهيه بلوك پارافينه و گرفتن مقاطع 5 ميكروني با روش هماتوكسيلين وايوزين رنگ آميزي شده و بخشي ديگر از نمونه ها بعد از صلايه و سانتريفوژ، آماده شده و به روش ساندويچ اليزا ميزان ويروس در هر يك از اررگان ها رديابي شد. بر اساس مطالعه ما حداكثر جراحات ناشي از ويروس تب برفكي به ترتيب دراپي تليوم كف پا، ريه،اپي تليوم زبان، وطحال مشاهده شد كه شامل : واكويوله شدن اسفنجي شكل داخل سلولي ،پيكنوز سلول طبقه خاردار و ادم بين سلولي در طبقه خارداراپي تليوم كف پا و زبان ، همچنين افزايش ديواره بين آلويولي ريه و كاهش پولپ سفيد در مقايسه با حيوانات شاهد ملاحظه شد كه نتايج بيانگر اين است كه دو روز پس از تزريق مقدار كمي ويروس فقط در طحال رديابي شده و در چهار روز پس از تزريق در ارگان‌هاي : قلب، ريه، لوزه المعده ، اپي تليال كف پاي تزريق نشده ويروس مشاهده شد كه مقدار ويروس كف پا بيشتر از ساير ارگان‌ها است ، دو هفته پس از تزريق در همه ارگان‌ها حضور ويروس رديابي شد كه حداكثر ميزان ويروس در اپي تليوم كف پا تزريق نشده شناسايي شد كه در ريه ، كبد و عقده لنفي مغابني به ترتيب حضور ويروس رديابي شد، يك ماه پس از تزريق ويروس در هيچ يك از ارگان‌ها يافت نشد. دو ماه پس از تزريق نيز در هيچ ارگاني رديابي نشد . در ضمن حضور ويروس در اپي تليوم كف پا، ريه، اپي تليوم زبان منجر به آثار پاتولوژيك گرديد كه تطابق نتايج حاكي از همپوشاني آزمايش الايزا و بررسي پاتولوژي با يكديگر است.

study on period of persistence of foot-and-mouth disease virus in different organs in guinea pigs . After adaptation of foot-and-mouth disease viruses type O in 10 guinea pigs pad’s, 30 Animal divided to 5 groups containing 6 animals in each group so that 5 animals inoculated from each group and normal saline injected in a guinea pig as negative control. Euthanized animal in 5 periods including: 2 days post virus generalization? 4 days post virus generalization ?14 days post virus generalization? 30 days post virus generalization? 60 days post virus generalization. Then collecting samples from: heart? lung? liver, spleen? pancreas? retropharyngeal lymph node, palntar epithelium, inguinal lymph node and tongue Epithelium, sent to Pathology Department to pathological studies also other of those sent to FMD Department to viral detection. Pathological samples fixed in formalin then prepared paraffin ،s blocks and slides with 5 microns with H&E staining. Viral samples kept in glycerinated buffer and detected the amount of virus by Sandwich Elisa according to reference. At least base on our study the maximum of FMDV lesions we observed affected plantar Epithelium? Lung? Tongue Epithelium and spleen consequently and showed that pathologic lesion contained: Intracellular spongiosis, vacuolization and pyknosis of cells from the spinous layer, Intercellular edema in spinous layer of Epithelium (plantar and Tongue) also Hyperemia and increased size of inter alveolar septa in Lung and decreased in white pulp compared to uninfected control guinea pig in spleen . In addition results of Elisa determined extreme amount of virus were in 14 days post virus generalization and we have not any evidence of being virus in 30 and 60 days post virus generalization. It is concluded that the results of Pathological observations can be confirmed by Elisa detection.