بررسي ژنتيكي مقاومت به آمانتادين در ويروس آنفلوانزاي H9N2 پرندگان در ايران بين سال هاي 1377 تا 1388

Genetical Evaluation of resistance to amantadine in H9N2 Avian influenza virus in Iran between 1998 to 2009

در سال 1377 يك اپيدمي از آنفلوانزاي پرندگان در ايران شيوع پيدا نمود كه عامل بسياري از تلفات در مرغداري هاي ايران گشت. تحقيقات به عمل آمده نشان داد كه عامل پيدايش اين همه گيري، ويروس آنفلوانزاي پرندگان با تحت تيپ H9N2 مي باشد. به جهت درمان و پيشگيري عفونت هاي ناشي از ويروس هاي آنفلوانزاي A در جهان، داروهاي ضد آنفلوانزاي آمانتادين و ريمانتادين (آدامانتان ها) مورد استفاده قرار مي گرفتند كه با افزايش مقاومت ويروس آنفلوانزا در برابر اين داروها در سال هاي اخير استفاده از آنها محدود گرديده است. در يك بررسي مقايسه اي بين سال هاي 1377 تا 1388 در ايران، به جهت ارزيابي مقاومت به آمانتادين در ويروس هاي آنفلوانزاي A پرندگان تحت تيپ H9N2 تحقيقات خود را بر ساختار ژنتيكي ويروس، جايي كه آمانتادين بيشترين اثر خود را روي كانال پروتييني M2 برجاي مي گذارد، معطوف نموديم. دو گروه ويروس آنفلوانزاي پرندگان با تحت تيپ H9N2 مشتمل بر پنج نمونه ويروس مورد بررسي، مربوط به دو دوره زماني (1385-1377 و 1388-1386) در تخم مرغ جنين دار جداسازي شدند، سپس تحت آزمايشات واكنش هاي زنجيره اي پليمراز به روش نسـخه بـرداري معكوس (RT-PCR) و الكتروفورز بر روي ژل آگاروز قرارگرفته و جهت تعيين توالي فرستاده شدند. تحليل توالي ژني پروتيين ماتريكس M2 نشان مي داد كه در قسمت هاي مجزا ازاين توالي، تعويض اسيدهاي آمينه نسبت به توالي مورد توافق رخ داده است و كليه جدايه هاي مقاوم، جهش هاي نقطه اي سرين به آسپارژين (S31N) را كه در جايگاه 31 منجر به مقاومت به آمانتادين مي شود، در برداشتند. در بررسي كه جهت تعيين آگاهي از تاثيرپذيري ويروس هاي آنفلوانزاي پرندگان به آمانتادين صورت گرفت مقاومت به آمانتادين در ويروس هاي آنفلوانزاي پرندگان تحت تيپ H9N2 در ايران در سال هاي 1386 تا 1388 گزارش شد. از اين رو توصيه مي گردد جهت درمان و پيشگيري عفونت هاي ناشي از ويروس هاي آنفلوانزاي پرندگان تحت تيپ H9N2 در مزارع، مصرف خودسرانه آمانتادين صورت نپذيرد. همچنين به نظر مي رسد آزمايشات عملي تاثيرپذيري دارو در شرايط درون تني نيز، مي تواند متضمن استعمال موثر آن دارو گردد.

Spread of an epidemic of avian influenza in 1998 in Iran was the cause of many deaths on farms. Research shows that made the emergence of this epidemic of avian influenza virus subtype H9N2. Anti-influenza drugs amantadine and rimantadine (Adamantane) were used for the treatment and prevention of infections caused by influenza A virus, but the use of these medications has been limited in recent years with increased resistance in the world. In a comparative study between the years 1998 to 2009 in Iran, to evaluate resistance to amantadine, the avian influenza A virus of subtype H9N2, we focused our research on the genetic structure of viruses, amantadine where most of their leaves left on the channel protein M2. Two groups of avian influenza A virus H9N2 subtype, were isolated in eggs with embryos, including five samples of the virus to two periods (1998-2006 and 2007-2009), then were the polymerase chain reaction tests using reverse transcription (RT-PCR) and electrophoresis on agarose gel and were sent for sequencing. The M2 sequence analysis displayed in different separate parts of this sequence as to consensus sequence that was amino acid changes together. And all of resistant isolates contained the point mutations (Ser to Asn) S31N at position 31 that could confer resistance to amantadine. The study took place, to determine the effectiveness of awareness of avian influenza viruses to amantadine, was reported, amantadine resistance in H9N2 subtype avian influenza viruses in the years 2007 and 2009 in Iran. Therefore, it is recommended to avoid the arbitrary use of amantadine to treat and prevent infections from avian influenza viruses of H9N2 subtype in the farms. Furthermore, it seems practical tests of the drug influence invivo, can ensure effective use of the drug.