بررسي اثر سيتوتوكسيك و آنتي پروليفراتيو داروي حصا-آ بر روي سلولهاي رده NB4(لوسمي پروميلوسيتيك حاد)

Effect Of HESA-A On Acute Promyelocytic Cell Line(NB4)

زمينه و هدف: لوسمي‌هاي حاد يكي از دلايل عمده سرطان در جهان مي‌باشند. امروزه مي‌توان از مواد طبيعي بعنوان يك منبع براي درمان سرطان استفاده كرد. حصا-آ دارويي با منشا دريايي و تركيبي از گونه‌هاي دريايي مثل شاميگو و گونه‌هاي گياهي مثل كرفس و زيره مي‌باشد. حصا-آ شامل اجزاي معدني(50%)، اجزاي آلي(45%) و آب(5%) مي‌باشد و داراي اثرات ضد سرطاني و سيتوتوكسيك است. در اين مطالعه تاثير اين دارو بر روي رده سلولي NB4(لوسمي پروميلوسيتيك حاد) ارزيابي شده است. روش بررسي: حصا-آ در نرمال سالين به عنوان محلول استوك تهيه شد(غلظتmg/ml 80 و 4/7PH=) و سپس استريليزه گرديد. بعد از كشت و تكثير رده سلولي NB4، سلولها با دوزهاي mg/ml 1، 2، 4 و 8 ميلي گرم در دسي ليتر تيمار شدند. درصد سلولهاي زنده و مرده با رنگ آميزي تريپان بلو و توسط لام نيوبار شمارش گرديد. بوسيله‌ي روشMTT درصد بقا سلولها توسط الايزا ريدر در570 نانومتر تعيين شد. توسط فلوسيتومتري تاثير دارو بر روي آپوپتوز مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: اين مطالعه نشان داد كه حصا-آ واجد اثر سيتوتوكسيك و آنتي پروليفراتيو وابسته به دوز برعليه رده سلوليNB4 مي‌باشد و در دوز mg/ml 5 قادر به آپوپتوز در50% سلولها مي‌باشد. نتيجه‌گيري: اگر چه مكانيسم دقيق عملكرد سيتوتوكسيسيتي حصا-آ هنوز ناشناخته است، اما در اين مطالعه مشخص شد كه اين دارو در سطح سلولي، سلولها را وادار به آپوپتوز سلولي در يك روش وابسته به دوز مي‌نمايد.

Background and Aim: Acute leukemia is one of the main causes of cancer in the world. Now a days using natural materials as source of anticancer drugs is more recommended. HESA-A is a drug of herbal-marine origin (patented by Iranian researcher). HESA-A is composed of 50% inorganic substance، 45% organic substance (aminoenthraquinone) and 5% water. In this study effects of HESA-A، on NB4 cell line (Acute promyelocytic leukemia cells) was evaluated. Materials and Methods: HESA-A was prepared in normal saline as a stock solution (80 mg/ml, PH=7.4), and then was sterilized. After culturing and proliferation of NB4 cell line, the cells were treated by doses of 1, 2, 4 and 8 mg/ml of HESA-A. Respectively after 72h, the percentage of viable and dead cells were counted by using Trypan blue staining in Neubanr hemocytometer. Then by MTTassay, the percentage of cell survival were determined by ELISA reader in 570nm. Finally the effects of HESA-A on apoptosis were evaluated by flocytometery. Results: This invitro study shows that HESA-A has a cytotoxcic and antiprolifrative effects against NB4 cell line (Dose dependent).IC50 dose was 5mg/ml .HESA-A can result in apoptosis in 50% of the cells. Conclusion: Although the mechanism of HESA-A cytotoxicity action is not known, yet this study shows that this drug may cause apoptosis of cells by dose dependent method. Key words: Acute Leukemia, NB4 Cell Line, HESA-A, Apoptosis