مقايسه دو روش استخراجRNA,ويروس برونشيت عفوني طيور

A comparison of two RNA Extraction methods for the RNA of Chicken infectious bronchitis virus

در حال حاضر بهترين روش تشخيص بيماري برونشيت عفوني طيور، جداسازي ويروس در تخم مرغ جنين دار و سپس شناسايي آن با آزمايش RT-PCR است. تاكنون از روشهاي متفاوتي براي استخراج RNA اين ويروس استفاده شده است. در اين مطالعه دو روش استخراج RNA با گوانيدين ايزوتيوسيانات و SDS پروتيناز k كه تاكنون بيشتر مورد استفاده قرار گرفته اند با يكديگر مقايسه شدند. بدين منظور RNA ويروس با استفاده از اين روشها استخراج و در سنجش اسپكتروفتومتريك و آزمايش RT-PCRبا يكديگر مقايسه شدند. براساس قابليت استفاده از به دست آمده از هر دو روش، در آزمايش RT-PCR، و نيز سنجش اسپكتروفتومتريك ميزان RNA استخراج شده، به نظر مي رسد كه استفاده از گوانيدين ايزوتيوسيانات در مقايسه با SDS پروتييناز k با نتايج بهتر و يكنواخت تري همراه است و بنابراين استفاده از اين روش توصيه مي گردد.

Currently, the most convincing diagnostic of chicken infectious bronchitis, is the virus isolation inembryonated chicken egg, fllowwed by RT-PCR identification of the virus. To isolate the viral RNA of infectious bronchitis virus ,so far different protocols have been applied. In the present study, two viral RNA isolation methods, Guanidine isothiocyanate or SDS. Proteinase K have been compared. RNA isolated by each method was tested in RT-PCR and also measured by spectrophotometer. Based on the results of RT-PCR and RNAmeasurement, the isolation method by Guanidine isothiocynate appears To have more efficient and consistent results than SDS- Proteinase K.