بررسي اثر سيليبين بر بيان گيرنده HER2 در رده سلولي SKBR3 سرطان سينه

Survey the Effect of Silybin on HER2 in SKBR3 Breast CancerCell Line

مقدمه: EGFR2)يا HER2 (ERBB2 از آنكوژن‌هاي معروف در سرطان سينه است كه در حدود 30% از سرطان هاي سينه بيان آن افزايش مي يابد. در مطالعات متعدد آنتي‌اكسيدان هاي پلي فنول طبيعي، به علت كارايي بالا و تاثير جانبي كم يكي از موثرترين تركيب‌هاي مهاركننده سرطان شناسايي شده اند. سيليبين ماده موثره گياه خار مريم يك پلي فنول فلاونوليگنان است كه در سال‌هاي اخير به دليل دو خاصيت آنتي اكسيداني و ضدسرطاني بسيار مورد توجه قرار گرفته است. هدف: بررسي تاثير سيليبين بر گيرنده HER2 در رده سلولي SKBR3 سرطان سينه مواد و روش ها: ابتدا رده سلولي SKBR3 كشت داده شد و سپس از آزمايشMTT براي تعيين ميزان سميت سيليبين و از روش RT-Real Time PCR در بررسي ميزان بيان ژن در حضور و بدون حضور سيليبين استفاده شد. نتايج: با آزمايش MTT ميزان سيتوتوكسيسيته سيليبين در دوزهاي 50 تا 350 ميكرومولار طي 24، 48 و 72 ساعت در رده SKBR3 بدست آمد و مشخص شد كه سيليبين به صورت وابسته به غلظت و وابسته به زمان داراي اثر بازدارندگي بر اين رده سلولي است. ميزان IC50 سيليبين طي 48 و 72 ساعت به ترتيب47/274 و 38/203 ميكرومولار و با Real Time RT-PCR كاهش بيان HER2 طي24، 48 و 72 ساعت در دو دوز 150 و 250 ميكرومولار به‌دست آمد. نتيجه گيري: مي توان از سيليبين در سرطان هاي سينه HER2 مثبت جهت كاهش بيان اين ژن استفاده كرد كه در مقايسه با دارو هاي ضد سرطان HER2 مثبت داراي تاثير جانبي كمتر و عمومي‌بودن بيشتر در سرطان هاست

Introduction: One of the most well-known oncogenes in breast cancer is HER2 (ERBB2 or EGFR2). The principal component of Milk Thistel is silybin, a polyphenolic flavonolignan isolated from silymarin, with both anti-oxidant and anti-cancer properties. Natural polyphenols are one of the most effective components for inhibiting cancers due to their high efficiency and fewer side effects. Objective: Investigating the effect of silybin on HER2 gene expression in SKBR3 breast cancer cell line. Materials and Methods: First, the SKBR3 was cultured, then we used MTT assay to determine the toxicity of silybin. Finally, using RT-Real Time PCR we studied the gene expression. Results: The cytotoxicity of silybin was evaluated by MTT assay in SKBR3 cell line in eight doses (50 - 350 µM) after 24, 48 and 72 h. Silybin showed dose and time dependent cell growth inhibitory effects in this cell line. The IC50 values of silybin after 48 and 72 h were determined to be 274/47 and 203/38, respectively. The results of Real Time RT-PCR indicated the significant down regulation of HER2 by 150 and 250 µM of silybin after 24, 48 and 72h. Conclusion: Silybin can be used for HER2 positive breast cancer to down regulate HER2 gene expression, thanks to respective fewer side effects and extensive effects on different cancers.