بررسي اثر HESA-A بر تكثير و آپوپتوز رده سلولي لوسمي ميلوژن مزمن(K562)

Assesment Of The Efficacy Of HESA-A On The Proliferation And Apoptosis Of Chronic Myelogenous Leukemia Cell Line(K562)

زمينه و هدف: لوسمي ميلوژن مزمن، بدخيمي خوني مرتبط با ژن الحاقي BCR-ABL1 و فعاليت مداوم ABL-1 است. ايماتينيب خط اول درمان اين لوسمي است، اما جمعيتي از بيماران به آن مقاومت نشان مي‌دهند. بر اين اساس هدف از اين پژوهش، مطالعه تاثير داروي HESA-A بر تكثير و آپوپتوز رده سلولي لوسمي ميلوژن مزمن(K562) مي‌باشد. روش بررسي: در اين مطالعه بنيادي از سلولهاي K562 استفاده شد و زمان دو برابر شدن سلولها محاسبه گرديد. داروي A HESA- در غلظت‌هاي 1، 2، 4و 8 ميلي گرم در ميلي ليتر بر سلولها اثر داده شد. پس از 72 ساعت جهت بررسي اثر سايتوتوكسيسيتي و تعيين IC50 ، MTT Assay وTrypan Blue Exclusion Assay انجام شد. سپس سلول‌ها 48 ساعت با دوز IC50 دارو مجاور شدند و آپوپتوز به روش فلوسايتومتري انجام شد. بررسي داده‌ها با آزمون Unpaired t test به عمل آمد. يافته‌ها: زمان دو برابر شدن رده سلولي K56224 ساعت محاسبه شد. نتايج MTT وTrypan Blue Exclusion Assay، كاهش وابسته به دوز سلول‌هاي زنده K562 را نشان داد. IC50 دارو 5/3 ميلي گرم در ميلي ليتر بدست آمد. 22/19 درصد از سلولهاي تيمار شده در هيستوگرام فلوسايتومتري در مكان سلولهاي نكروزي قرار گرفتند. نتيجه‌گيري: HESA-A داراي اثر سايتوتوكسيسيتي بر سلولهاي K562 در الگوي وابسته به دوز است، و به نظر مي‌رسد به كمك القا مرگ نكروزي توانسته است تاثير گذار باشد.

Background and Aim: Chronic myelogenous leukemia is characterized by Philadelphia (Ph) chromosome, the presence of BCR-ABL fusion gene and constitutive activation of the ABL1 tyrosine kinase. Despite an excellent result of target therapy by imatinib, some patients develop resistance to imatinib. In this study Efficacy of HESA-A on proliferation and apoptosis of K562 cell line was assessed. Materials and Methods: In this study doubling time of K562 cell line was calculated. The cells were affected by various concentrations of HESA-A(1,2,4 and 8 mg/ml respectively). Cytotoxicity and IC50 dose of HESA-A were detected by MTT and trypan blue exclusion assay. Apoptosis was assessed by flowcytometry after 48 h cell treatment in the presence of IC50 dose. Results: Doubling time of K562 cells was 24 hours. HESA-A reduced the number of viable K562 cells in a concentration dependent manner.IC50 dose was 3.5 mg/ml. In flowcytometry analysis of apoptosis, 19.22% of the treated cells were located in the position of the necrotic cells. Conclusion: The results of MTT and trypan blue exclusion assay suggest that HESA-A inhibits the growth of k562 cells in a concentration dependent manner and induces necrosis in K562 cells. Key words: Chronic Myelogenous Leukemia, HESA-A, Cytotoxicity, Apoptosis