تشخيص ميكرومتاستاز كارسينوماي سلول كليوي توسط ماركر CA9 با استفاده از روش Real-Time RT PCR

Detection of micro-metastasis of renal cell carcinoma by CA9 marker using Real-time PCR

چكيده سابقه و هدف حدود 40 درصد از مبتلايان به سرطان كليه حتي پس از خارج نمودن كامل كليه(راديكال نفركتومي) دچار متاستاز مي‌شوند. بنابراين يافتن راهي براي تشخيص شروع متاستاز بسيار ارزشمند مي‌باشد. در تحقيق حاضر، امكان تشخيص ميكرومتاستاز سرطان كليه با استفاده از نشانگر( (CA9مورد بررسي قرار گرفته است. مواد و روش‌ها در يك مطالعه تجربي، از 30 بيمار مبتلا به سرطان كليه كه به بيمارستان دكتر لبافي‌نژاد مراجعه نموده بودند، به صورت غير تصادفي در دسترس خونگيري به عمل آمد. اطلاعات مربوط به درجه و مرحله تومور هر يك از بيماران از پاتولوژي دريافت گرديد. از رده سلولي سرطان كليه به نام ACHN به عنوان كنترل مثبت استفاده شد. جهت بررسي ارتباط بين ميزان بيان ژن، درجه و مرحله تومور، از روش‌هاي آماري من‌ويتني U و كروسكال واليس استفاده گرديد. داده‌ها توسط نرم‌افزار 13 SPSS تحليل شدند. يافته‌ها از 30 بيمار مورد مطالعه، در 6 بيمار شاهد افزايش تعداد نسخه‌هاي ژنCA9 بوديم. از اين 6 بيمار، 3 بيمار در Stage I ، 2 تا در Stage II و 1 مورد در Stage III قرار داشتند. هم‌چنين پس از گذشت يك سال از نمونه‌گيري، پيگيري بيماران نشان داد كه 4 بيمار دچار متاستاز شده‌اند اما ارتباط معناداري بين تعداد نسخه‌هاي ژن با متاستاز يافت نگرديد. نتيجه گيري اين نتايج نشان مي‌دهد ژن CA9 مي‌تواند ماركر مناسبي جهت تشخيص ميكرومتاستاز در خون بيماران مبتلا به سرطان سلول كليه(RCC) باشد. هم چنين اميد است با پيگيري طولاني مدت بيماران مبتلا به سرطان در آينده امكان پيش‌بيني وقوع متاستاز توسط سنجش ماركر CA9 فراهم گردد.

Abstract Background and Objectives The global prognosis of renal cell carcinoma (RCC) remains poor; about 40% of patients will develop metastasis after nephrectomy. There is a strong need to identify the early metastasis. The present study aimed to test if analysis of the CA9 gene in peripheral blood can provide useful information to predict micro metastasis. Materials and Methods In this experimental study, patients (n=30) with RCC were evaluated for peripheral blood CA9 expression non-randomly. Data of tumor grade were received from the pathologist. Total RNA extraction and cDNA synthesis were performed. CA9 expression levels of patients were compared with the normal group (n=16) by real-time PCR. The Mann-Whitney U test and Kruskal-wallis test were used to compare CA9 expression levels with tumor grades. SPSS13 was used for data analysis. Results Six of patients show high CA9 expression (3 in grade I, 2 in grade II, and 1 in grade III) but no significant difference was found between CA9 expression level and tumor grade. After one year follow up, 4 patients were found to have a metastasis but no significant difference was found between CA9 expression level and metastatic patients. Conclusions On the basis of the results of this study, CA9 is a tumor-specific marker for RCC with a high degree of expression in the conventional RCC. At the same time, the detection of CA9 gene expression in the peripheral blood of patients with RCC may predict increasing risk of micro metastasis. Key words: Renal Cell Carcinoma, Micrometastasis, Carbonic Anhydrases