رديابي ژن‌هاي مقاوم به بيماري پژمردگي فوزاريومي در ارقام گوجه‌فرنگي با استفاده از نشانگر CAPS

Identification of resistant genes linked to fusarium wilt disease in tomato (Lycopersicon esculentum) cultivars using CAPS markers

بيماري‌هاي فوزاريومي در اغلب مناطق كشت گوجه‌فرنگي باعث كاهش توليد عملكرد اين محصول مي‌شوند. بهترين روش كنترل اين بيماري تهيه و استفاده از ارقام مقاوم به فوزاريوم است. انتخاب فنوتيپي ارقام مقاوم گوجه‌فرنگي كاري پيچيده و بسيار زمان‌بر مي‌باشد. نشانگرهاي مولكولي كه با ژن مقاومت به بيماري پژمردگي فوزاريومي پيوستگي دارند، مي‌توانند براي غربال كردن مواد ژنتيكي مقاوم به اين بيماري مورد استفاده قرار گرفته و در برنامه‌هاي به‌نژادي گوجه‌فرنگي كمك نمايند. در اين مطالعه نشانگر CAPS به نامTAO1902 در 27 رقم تجاري گوجه‌فرنگي براي شناسايي ارقام داراي ژن مقاوم I-2 به نژاد 2 قارچ Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici كه قدرت بيماري‎زايي بالايي در ايران دارد، مورد استفاده قرار گرفت. ابتدا DNA به روش CTAB استخراج شد و سپس PCR-RFLP با استفاده از آنزيم‌هاي برشي RsaI و FokI به منظور بررسي وجود يا عدم وجود آلل I-2 در ارقام گوجه‌فرنگي مورد استفاده قرار گرفت. يك نوار 500 جفت بازي در پاسخ به آنزيم RsaI و دو نوار 390 و 400 جفت بازي در واكنش با آنزيم FokI تشكيل شد. نتايج نشان داد كه از 27 رقم مورد بررسي، 14 رقم مقاوم هموزيگوت و 13 رقم حساس بودند. ارزيابي آزمون بيماري‎زايي نشان داد كه ارقامي از گياه گوجه‌فرنگي كه قطعه مربوط به ژن مقاوم I-2 را تكثير كرده بودند، فاقد هر نوع علايم بيماري بودند، اما گياهاني كه اين قطعه ژني را نداشتند علايم بيماري را با شدت‌هاي مختلف نشان ‌دادند. در مجموع از ميان 27 رقم و هيبريد گوجه‎فرنگي مورد بررسي، هفت رقم و هفت هيبريد نسبت به قارچ F. oxysporum f. sp. lycopersici مقاومت نشان دادند، بنابراين اين ارقام در مناطقي كه نژاد 2 در آن‌ها غالب است، قابل توصيه مي‌باشند.

Fusarium wilt causes cosiderable yield loss in most tomato-growing regions around the world. The best way to control this disease is using tomato resistant cultivars. Molecular markers linked to resistance gene would be useful for tomato improvement programs. In this study, a cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) marker (TAO1902) was used to identify tomato cultivars possessing I-2 gene, which confers resistance to Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici race 2. DNA was extracted using CTAB method from 27 hybrids and commercial tomato varieties. To evaluate existence of I-2 gene in tomato cultivars, PCR-RFLP was down using RsaI and FokI restriction enzymes. An RsaI-digested fragment of 500 bp and two restriction fragments of 390 and 410 bp for FokI digestion of TAO1902 were revealed in the resistant varieties. Results showed that 14 out of 27 tomato hybrids and cultivars were homozygous resistant and the other 13 hybrids were susceptible to fusarium wilt. Pathogenicity test showed that there were no symptoms in resistance gene I-2 amplifing tomato varieties. However, tomato varieties with no resistance band produced disease symptoms with different disease intensities. Results showed that 7 out of 27 tomato cultivars and hybrids, and 7 hybrids were resistant to F. oxysporum f. sp. lycopersici race 2 and so, these cultivars and hybrids are recommended in regions that race 2 is dominant.