بررسي چندشكلي در اينترون سوم ژن هورمون رشد گاو بومي گيلان با استفاده از روش PCR-RFLP

Polymorphisms in third intron of growth hormone of Guilan native cows using PCR-RFLP markers

ژن هورمون رشد گاوي (bGH)، بخشي از خانواده ژن هاي پرولاكتين و لاكتوژن هاي جفتي است. تنوع موجود در اينترون‌هاي اين ژن، پتانسيل ويژه اي براي استفاده به عنوان ماركرهاي ژنتيكي از خود نشان داده و مي تواند به بهبود ژنتيكي جمعيت ها كمك كند. به منظور بررسي فراواني آللي MspI در اينترون سوم ژن هورمون رشد گاوهاي بومي گيلان، به طور تصادفي 70 راس گاو از اين جمعيت تعيين و از آنها نمونه خون تهيه شد. با استفاده از روش تغيير يافته استخراج نمكي، DNA نمونه ها استخراج شد. سپس با استفاده از روش واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) قطعه 345 جفت بازي در اين ناحيه تكثير و محصول PCR با استفاده از آنزيم MspI هضم شد. سپس به منظور تعيين ژنوتيپ، نمونه هاي هضم شده به ژل اكريل آميد 8% منتقل شدند. اين آنزيم داراي 2 مكان برش روي قطعه مورد نظر بوده و در اثر هضم با آنزيم MspI سه ژنوتيپ مشاهده شده و فراواني آللي (+)MspI 4643/0 محاسبه شد. آزمون كاي مربع بيانگر وجود حالت تعادل در فراواني محاسبه شده براي آلل MspI بود.

Bovine growth hormone(bGH) gene, is a part of the multiple gene family that contains prolactin and placental lactogens. The variations in the introns of this gene, have potential usefulness as genetic markers and could help in the genetic improvement of populations. In ordre to investigate allele frequency of MspI in introne 3 of growth hormone gene of Guilan native cattle breed, blood samples were collected from seventy heads of randomaly choosen cattles (cows). Genomic DNA was extracted from these samples, using modified salting out method. Polymerase chain-reaction (PCR) procedure was used to amplify a 345 bp segment in this region and then digested with MspI restriction enzymes. Digested samples were run on the acrylamid gel 8% to recognize their genotype. This enzyme had two restriction sites and after digestion with MspI enzyme on that fragment and 2 allels and 3 genotypes have been observed. Frequency of MspI(+) allele was estimated to 0.4643. X2 test has showed the equilibrium of frequency MspI in samples.