اثر فاكتور رشد شبه انسولين- يك بر قابليت تكوين رويان هاي گاوي توليد شده از اووسيت هاي تحت تنش گرمايي در محيط كشت آزمايشگاهي

M. Zhandi 1, A. Towhidi2, A. Zare-Shahneh3, M. Khodaei Motlagh4, H. Deldar5 and A. Akhlaghi6

هدف از انجام اين پژوهش، ارزيابي اثر فاكتور رشد شبه انسولين- يك (IGF-1) در محيط كشت آزمـايشگاهي بـر قابليت تكويـن رويـان هـاي گـاوي توليد ش«ده از اووسيت هاي تحت تنش گرمايي بود. اووسيت هاي نابالغ به طور تصادفي به دو گروه تقسيم شدند و 12 ساعت اول دوره بلوغ آزمايشگاهي را در 5/38 يا 41 (گروه تنش گرمايي) درجه سانتي گراد و 12 ساعت دوم را در 5/38 درجه سانتي گراد سپري كردند. بعد از بلوغ و لقاح آزمايشگاهي، زايگوت هاي احتمالي در هر گروه به طور تصادفي به دو گروه تقسيم و در حضور 100 نانوگرم در ميلي ليتر فاكتور رشد شبه انسولين- يك نوتركيب انساني يا بدون آن كشت داده شدند. نتايج نشان داد كه تسهيم تحت تاثير IGF-1 و تنش گرمايي قرار نگرفت، در حالي كه تشكيل بلاستوسيست به طور معني داري به وسيله IGF-1 در حضور و يا عدم حضور تنش گرمايي افزايش يافت. همچنين، تنش گرمايي مقدار تشكيل بلاستوسيست را در مقايسه با گروه شاهد (5/38 درجه سانتي گراد و بدون IGF-1) كاهش داد. تعداد سلول هاي تروفكتودرم و توده سلول دروني و كل سلول ها به طور معني داري به وسيله IGF-1 در حضور و يا عدم حضور تنش گرمايي افزايش يافت. همچنين، تعداد بلاستومر هاي تانل مثبت نيز به طور معني داري به وسيله IGF-1 در حضور و يا عدم حضور تنش گرمايي كاهش يافت. نتايج اين پژوهش نشان مي دهد كه IGF-1 مي تواند قابليت تكوين رويان هاي گاوي توليد شده از اووسيت هاي تحت تنش گرمايي را بهبود بخشد. به نظر مي رسد كه IGF-1 قابليت تكوين رويان گاو را از راه افزايش تعداد كل سلول و كاهش مرگ برنامه ريزي شده سلولي بهبود مي بخشد.

The goal of this study was to assess the effect of Insulin like growth factor-1 (IGF-1) during in vitro culture on developmental competence of bovine embryos produced from heat-stressed oocytes. In this experiment, immatured oocytes were randomly assigned into two groups and matured at 38.5 or 41 °C for the first 12 hours of maturation followed by 12 hours at 38.5 °C. After in vitro maturation and fertilization, putative zygotes in each group were randomly allocated and cultured in the presence or absence of 100 ng/ml human recombinant (hr)-IGF-1. The results showed that cleavage rate was not affected by IGF-1 and heat stress, whereas blastocyst formation rate was significantly increased by IGF-1 in the presence and/or absence of heat stress. In addition, heat stress decreased blastocyst formation rate compared to the control (38.5 °C without IGF-1) group. The number of trophectoderm cells, inner cell mass and total cell number were significantly increased by IGF-1 in the presence and/or absence of heat stress. In addition, terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling (TUNEL)-positive nuclei were significantly decreased by IGF-1 in the presence and/or absence of heat stress. Results of this experiment demonstrated that IGF-1 can improve developmental competence of bovine embryos produced from heat-stressed oocytes. It seems that IGF-1 improve bovine embryo developmental competence via increasing of total cell number and decreasing of apoptosis.