شناسايي و همسانه سازي ژن هاي سوپراكسايد ديسموتاز Cu/Zn (1 AlSODو 2AlSOD) از گياه هالوفيت Aeluropus lagopoides

Isolation and Cloning of Cu/Zn Superoxide Dismutase Genes (AlSOD1 and AlSOD2) From Halophyte Plant Aeluropus lagopoides

راديكال هاي آزاد اكسي‍ژن مهمترين عامل تنش گياهان به شمار مي روند. آنزيم هاي سوپراكسايد ديسموتاز به عنوان اولين سد دفاعي گياهان در مقابل سميت اكسيژن، راديكال هاي سوپراكسايد را تجزيه مي نمايند. اين آنزيم ها براي حيات هوازي ضروري بوده و در فرآيند مقاومت در برابر تنش ها و طول عمر گياه نقش موثري ايفا مي نمايند. گياه آلروپوس لگوپوييدس از جمله گياهان هالوفيتي است كه بدليل تحمل بالا به شوري خاك، داراي فعاليت مناسبي از آنزيم هاي سوپراكسايد ديسموتاز مي باشد. با طراحي پرايمرهايي از ژن هاي SOD ساير گياهان خانواده گندميان، اقدام به جداسازي ژن هايي از گياه هالوفيت آلروپوس لگوپوييدس گرديد. در فرآيند اين تحقيق، دو ژن جديد به نام هاي پيشنهادي 1 AlSODو 2AlSOD از اين گياه هالوفيت جدا و پس از همسانه سازي در ناقل pTZ57R/T باكتريايي اي، كولي، تعيين توالي گرديدند. با تعيين توالي اين ژن ها مشخص گرديد كه هر كدام از اين ژن ها 152 امينو اسيد را كد مي نمايند و از نظر توالي نيز شباهت زيادي با ژن سوپراكسايد ديسموتاز ساير گياهان خانواده گندميان از جمله آلروپوس ليتوراليس (92%)، ذرت (89%)، ارزن (88%) و برنج (87%) دارند.

The active oxygen species are the most important plant stress agents. Superoxide dismutase is a key enzyme which constitutes the first line of defence against oxygen toxicity. This enzyme is necessary for aerobic life and play an effective role in the process of tolerance to stress and plant longevity. Aeluropus lagopoides is a halophyte plant that tolerate high soil salinity and have high activity of superoxide dismutase enzyme. We used the sequences of SOD genes from another plants in Poaceae family for primer designing and isolated genes from halophyte plant Aeluropus lagopoides. In this investigation two novel SOD genes AlSOD1 and AlSOD2 isolated and cloned in E.coli via pTZ57R/T cloning vector. These two genes encoding 152 amino acids and also have high homology with Cu/Zn SOD Aelurous littoralis, Zea mays, Phyllostachys edulis and Oryza sativa with 92, 89, 88 and 87% respectively.