استفاده از ماده بنيادي بافت لثه انسان جهت ساخت

Application of human palate gingival tissue in constructing a three-dimensional scaffold

زمينه و هدف: ماده بين سلولي(ECM) شبكه اي از پروتيين ها و گليكوزآمينوگليكان ها ((GAGs است كه محيط لازم براي تكوين سلولي، هوموستاز و ترميم را فراهم مي كند. خواص بيوشيميايي اين محيط تاثير عمده اي در الگوي رفتار هاي سلولي دارد. هدف اين تحقيق تهيه محيط كشت (داربست) سه بعدي از بافت لثه كامي انسان و بررسي امكان كاربرد اين داربست هاي تهيه شده، در تحقيقات مهندسي بافت مي باشد. روش كار:‌ بافت لثه كامي انسان به صورت بيوپسي تهيه شد و سلول زدايي به روش فيزيكي (با استفاده از تانك ازت) و سپس به روش شيميايي (با استفاده از سديم دودسيل سولفات (SDS)) انجام شد. پس از تثبيت بافت در بوين و مراحل پاساژ بافتي، رنگ آميزي H&E وPAS انجام شد. يافته ها:‌ پس از سلول زدايي در غلظت يك درصد SDS، تنها ماده خارج سلولي بافت لثه باقي ماند، سلول هاي بافت همبند و لايه اپي تليوم به طور كامل حذف شدند. پاسخ به رنگ آميزي PAS مثبت بود. نتيجه گيري: به نظر مي رسد داربست مشتق شده از ماتريكس خارج سلولي بافت لثه كامي به دليل حفظ برخي از گليكوپروتيين ها (از نوع خنثي) احتمالاً مدل مناسبي براي تهيه محيط كشت سلولي و بررسي بر هم كنش بين سلول ها در شرايط آزمايشگاهي باشد. واژه هاي كليدي: ماده خارج سلولي، بافت لثه كامي، گليكوز آمينوگليكان ها.

Introduction: The extracellular matrix (ECM) is a network of proteins and glycoaminoglycans that provide a microenvironment for cellular development, homeostasis, and regeneration. The biochemical properties of matrix have important roles in patterns of cell adhesion to matrix and cell behavior. The main aim of this research was to provide a three-dimensional matrix using the human palate gingival tissue and examine the possibility of application of this scaffold in cell culture and tissue engineering. Materials and Methods : Biopsies of human palate gingival tissue were prepared, and decellularization was performed via both physical (snap freezing) and chemical (using SDS) methods, followed by fixation, passage, H&E and PAS staining. Results: The results showed that after decellularization with 1% SDS, only the extracellular matrix of gingival was remained, while cells of the epithelial layer and the connective tissue had been removed completely. PAS staining was positive. Discussion: It appears that the decellularized human palate gingival tissue, by possessing certain glycoproteins of neutral type, is probably a suitable model for studying cell-matrix interactions in vitro. Keywords: Extracellular Matrix, Palate Gingival Tissue, Glycoaminoglycans