مطالعه بيان اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 در سلول‏هاي آستروگليال موش‏هاي C57BL/6

Study of the Expressions of IL-20R1 and IL-20R2 in C57BL/6 Mice Astroglial Cells

هدف: آستروسيت‏ها بيشترين سلول‏هاي موجود در مغز هستند. اين سلول‏ها قادرند االتهاب سيستم اعصاب مركزي را وابسته به سايتوكين‏هايي كه توليد مي‏كنند آغاز يا مهار نمايند. انتقال پيام اينترلوكين 19، اينترلوكين 20 و اينترلوكين 24 از طريق اتصال به يك گيرنده هترودايمر متشكل از زنجيره ? اينترلوكين 20R1 و زنجيرهB اينترلوكين 20R2 صورت مي‏گيرد. مطالعات گذشته روشن نموده‏است كه انتقال پيام توسط اين كمپلكس‏هاي گيرنده واكنش‏هاي ايمني را تحت تاثير قرار مي‏دهد؛ اما اعمال زيست‏شناختي اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 در مغز تاكنون روشن نشده است. به عنوان اولين مرحله براي شناخت نقش اين گيرنده‏هاي سايتوكيني در مغز، بيان گيرنده‏هاي اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 توسط آستروسيت‏هاي موش C57BL/6 بررسي شد. مواد و روش‏ها: در اين تحقيق آستروسيت‏ها و رده سلولي آستروسيتوما 1321N1 توسط پپتيد ميلين اليگودندروسيت گليكوپروتيين، ليپو پلي‏ساكاريد و GM-CSF تحريك شدند و توليد پروتيين گيرنده‏هاي اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 به روش فلوسيتومتري بررسي شد. همچنين تاثير ليپو پلي‏ساكاريد بر توليد mRNA اين گيرنده‏هاي سايتوكيني توسط آستروسيت با استفاده از روش RT-PCR مطالعه شد. نتايج: براي اولين بار در اين مطالعه نشان داده شد كه آستروسيت‏ها قادرند mRNA اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 نه تنها در پاسخ به تحريك ليپو پلي‏ساكاريد بلكه در غياب آن نيز بيان نمايند. به علاوه؛ بيان پروتيين اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 بر سطح آستروسيت‏ها و رده سلولي آستروسيتوما 1321N1 تشخيص داده نشد. نتيجه‏گيري: mRNA اينترلوكين 20R1 و اينترلوكين 20R2 به طور ساختاري و دايم در آستروسيت‏ها بيان مي‏شود.. از آن‏جايي كه در بيشتر فرآيندهاي نوروپاتولوژيك آستروسيت‏ها و سايتوكين‏هاي التهابي نقش دارند اين يافته‏ها كه براي اولين بار گزارش مي‏شود در تحقيقات آينده اهميت ويژه‏اي دارد.

Objective: Astrocytes are the most abundant glial cell type. They may promote or inhibit CNS inflammation depending on which cytokines are secreted. Astrocytes also have immune roles. IL-19, IL-20, and IL-24 activate a heterodimer receptor composed of the IL-20R1 ?-chain and the IL-20R2 B-chain. It has long been considered that signaling by these receptor complexes affects immunological reactions, however the biological functions of IL-20R1 and IL-20R2 in the brain remain unclear. As the first step to address the role of these cytokine receptors in the brain, in this study we have researched the expressions of IL-20R1 and IL-20R2 in C57BL/6 mice astrocytes. Methods: We examined expressions of IL-20R1 and IL-20R2 proteins in mice astroglial cells and in the 1321N1 astrocytoma cell line in response to MOG, LPS and GM-CSF by flow cytometry. The effect of LPS on mRNA expression of IL-20R1 and IL-20R2 was investigated by RT-PCR. Results: We provide, for the first time, evidence that astrocytes expressed IL-20R1 and IL-20R2 mRNA not only in response to LPS stimulation but also in unstimulated astrocytes. We did not observe the expressions of IL-20R1 and IL-20R2 proteins in mice astroglial cells and the 1321N1 astrocytoma cell line. Conclusions: IL-20R1 and IL-20R2 mRNA are constitutively expressed in astrocytes. Because the majority of neuropathological processes involve astrocytes and inflammatory cytokines, the results of this study, which are reported for the first time, have important implications for future research.