ارزيابي اثر سيس‏پلاتين و نانوذرات مغناطيسي اكسيد آهن بارگذاري شده با سيس‏پلاتين روي بيان ژن‏هاي BCL2 و BAX در رده سلولي T47D سرطان پستان

Evaluation of Cisplatin and Cisplatin-loaded Magnetic Iron Oxide Nanoparticles on BCL2 and BAX genes in the Breast Cancer T47D Cell Line

هدف: سرطان پستان دومين عامل مرگ و مير سرطان در زنان است. سيس‏پلاتين يك داروي ضد سرطاني رايج شيمي درماني است كه سبب مرگ سلول‏هاي سرطاني مي‏شود. حساسيت سلول‏هاي سرطاني به داروهاي شيمي درماني اغلب به خاطر تغيير بيان در سطوح mRNA ژن‏هاي مرتبط با فرآيند مرگ سلولي برنامه‏ريزي شده است. نانوساختارهاي تحويل دهنده دارو براي انتقال غلظت‏هاي كمتر و موثرتر داروهاي شيمي درماني طراحي شده ‏است. در اين مطالعه بيان ژن‏هاي BCL2 و BAX در سلول‏هاي T47D تيمار شده با سيس‏پلاتين و نانوذرات بارگذاري شده با سيس‏پلاتين ارزيابي شد كه مي‏تواند منجر به افقي تازه در درمان سرطان پستان باشد. مواد و روش‏ها: در اين مطالعه سلول‏هاي T47D با غلظت‏هاي متفاوت سيس‏پلاتين و نانوذرات بارگذاري شده با سيس‏پلاتين به مدت 48 ساعت تيمار شدند. IC50 تعيين شد. RNA با استفاده از محلول RNX استخراج شد. سپس cDNA ساخته شد. آغازگرهاي اختصاصي براي ژن‏هاي BCL2، BAX و TBP با استفاده از از نرم‏افزار اختصاصي طراحي شد. ميزان بيان ژن‏هاي BCL2 و BAX نسبت به ژن TBP (ژن مرجع) با استفاده از روش Real-Time PCR بررسي شد. نتايج: بيان ژن‏هاي BCL2 و BAX در سلول‏هاي T47D تيمار شده با سيس‏پلاتين، به ترتيب به ميزان 07/0 و 48/1 و در سلول‏هاي T47D تيمار شده با نانوذرات بارگذاري شده با سيس‏پلاتين، به ترتيب به ميزان 03/0 و 41/2 تغيير يافت. نتيجه‏گيري: در اين بررسي نشان داده شد كه نانوذرات بارگذاري شده با سيس‏پلاتين يك تركيب ضد سرطاني موثر است. همچنين مشاهده شد كه نانوذرات سبب القاي مرگ برنامه‏ريزي شده در سلول‏هاي سرطان پستان مي‏شود. در اين مطالعه مشخص شد كه آثار سميت سلولي نانوذرات سيس‏پلاتين بر رده سلولي T47D بيشتر از سيس‏پلاتين تنهاست.

Objective: Breast cancer is the second leading cause of cancer death in women. Cisplatin is a traditional cancer drug commonly used in chemotherapy for killing cancer cells. Modulation at the mRNA levels of apoptotic related genes often correlate with the sensitivity of various types of cancer cells to chemotherapeutic agents. Nanoparticulate drug delivery systems are being developed to effectively deliver smaller doses of chemotherapeutic agents and control drug distribution in the body. In this study, we evaluate the expressions of BCL2 and BAX genes in T47D treated with cisplatin and cisplatin nanoparticles, which can result in a new approach to breast cancer therapy. Methods: In this study, we treated T47D cells with different concentrations of cisplatin and cisplatin nanoparticles at 48 h. The IC50 was determined. We extracted RNA by using RNX solution, after which cDNA was synthesized. The precise primers for the BCL2, BAX and TBP genes were designed by specific software. The quantity of BCL2 and BAX gene expression compared to TBP gene (reference gene) was analyzed using real-time PCR. Results: BCL2 and BAX gene expression levels in T47D cells treated by cisplatin were 0.7 (BCL2) and 1.48 (BAX); in T47D cells treated with cisplatin-loaded nanoparticles, the gene expressions were 0.03 (BCL2) and 2.41 (BAX). Conclusion: In this study, the results have shown that cisplatin-loaded nanoparticles are effective anticancer agents. Cisplatin nanoparticles induce apoptosis in human breast cancer cell lines. We have shown that cisplatin nanoparticles strongly increased cytotoxicity in comparison to the free drug in the T47D cell line.