اثرات افزودن رافينوز و تره‌هالوز بر شاخص‌هاي كيفيت اسپرم گاوميش بعد از ذوب

Effect of Raffinose and Trehalose on sperm parameters in buffalo bulls after thawing

هدف از انجام اين تحقيق بررسي تاثير سطوح مختلف رافينوز و تره‌هالوز بر كيفيت اسپرم گاوميش بعد ازذوب بود. براي اين منظور تعداد 20 انزال از چهار راس گاوميش نر در مركز تحقيقات و پرورش گاوميش شمال غرب كشور جمع‌آوري شد. نمونه‌هاي مني با كيفيت عالي و داشتن بيش از 70 درصد اسپرماتوزوييد با تحرك رو به جلو در دماي 37 درجه سلسيوس با رقيق كننده‌ تجاري بايوكسل داراي سطوح مختلف رافينوز و تره‌هالوز (صفر، 25 و 75 ميلي‌مول)، رقيق شد و پس از مرحله تعادل در دماي چهار درجه سلسيوس ظرف مدت چهارساعت، در ني هاي 5/0 ميلي‌ليتري پلاستيكي با اعمال زمان انجماد مشخص قبل از ورود به ازت مايع، منجمد و داخل كانتينرهاي حاوي ازت مايع نگه‌داري شدند. پس از دو هفته، ذوب نمونه ني‌هاي منجمد مورد نظر در دماي 37 درجه سلسيوس به مدت 40 ثانيه صورت گرفت. در اين راستا ميزان تحرك و برخي فراسنجه‌هاي كيفي نمونه‌هاي مورد نظر پس ازذوب با استفاده از ميكروسكوپ فازكنتراست صفحه گرم مجهز به سيستم ارزيابي كامپيوتري الگوي تحرك اسپرم مورد بررسي قرار گرفت. به طور كلي نتايج به دست آمده در اين تحقيق نشان دادند، افزودن مقادير صفر، 25 و 75 ميلي‌مول رافينوز و تره‌هالوز در رقيق كننده‌ تجاري بايوكسل براي انجماد مني گاوميش سبب بهبود ميزان تحرك و برخي فراسنجه‌هاي كيفي اسپرم پس از ذوب نشد (05/0 < P).

The study was designed to investigate the effect of Raffinose and Trehalose on sperm parameters in buffalo bulls after thawing. For this purpose, 20 ejaculates were collected from four buffalo bulls in Northwest Buffalo Research Center. Samples with excellent quality and more than 70% visual sperm motility were diluted at 37?C in Bioxcell extender with addition of (0, 25 and 75 mM) of Raffinose and (0, 25 and 75 mM) Trehalose. The diluted semen was equilibrated at 4?C within 4 hours. Then, filled in 0.5 ml French straws and were subjected to cooling condition before being plunged into liquid nitrogen. Semen was thawed at 37?C for 40 seconds after two weeks of storage inside liquid nitrogen. Sperm motility and some quality parameters of each frozen semen sample were assessed after thawing by warm plate phase contrast microscope and by CASA evaluation. In general, the results showed that the addition of 0, 25 and 75 mM raffinose and trehalose and interaction of raffinose in trehalose into the Bioxcell extender for freezing buffalo semen did not improved the motility of spermatozoa and some quality parameters after thawing (P > 0.05).