تخليص و بررسي فعاليت پروتيوليتيكي آنزيم فيسين انجير (فيكوس كاريكا )

Purification and Study of Proteolytic Activity of Ficin Enzyme of Fig (Ficus Carica)

مقدمه و هدف: فيسين عضوي از خانواده سيستيين پروتيازهاي گياهي است كه در انجير به وفور يافت مي شود. اين آنزيم كاربردهاي دارويي و صنعتي فراواني دارد. هدف اين مطالعه تخليص و تعيين برخي خصوصيات اين آنزيم و بررسي فعاليت پروتيوليتيكي آن بر روي چندين پروتيين گياهي و حيواني مي باشد. روش كار: در اين مطالعه تجربي آنزيم فيسين طي مراحل عصاره گيري، رسوب دهي با سولفات آمونيم و كروماتوگرافي تعويض يون در ستون كربوكسي متيل سفارز از ميوه نارس انجير خالص گرديد. جهت بررسي فعاليت پروتيوليتيكي آنزيم، فيسين خالص شده تحت چهار شرايط بافري مختلف بر پروتيين هاي كازيين، آلفا لاكتا لبومين، بتا لاكتوگلبولين و ژلاتين اثر داده شد. نتايج: محصول آنزيمي به دست آمده شامل دو باند پروتييني با اوزان 24 و 26 كيلودالتون بود. نتايج حاصل از تاثير فيسين بر پروتيين ها نشان داد كه اين آنزيم قادر به هضم كازيين بوده و داراي اثرات هيدرولازي كمتري بر بتا لاكتوگلبولين و ژلاتين است و بر آلفا لاكتا لبومين اثر بسيار كمتري دارد. نتيجه نهايي: با توجه به اثر نسبتاً انتخابي فيسين بر پروتيينهاي مورد مطالعه، اين آنزيم مي تواند يك كانديد مناسب با هدف هضم كازيين و توليد فرآورده هاي حاصل از آن باشد.

Introduction & Objective: Ficin is a member of plant cystein proteases that is abundant in fig. This enzyme has many pharmacological and industrial uses. In the present study, the enzyme was purified by a simple procedure and its proteolytic activity was assayed on several plant and animal proteins. Materials & Methods: Ficin was extracted from unripe fig, precipitated by ammonium sulfate and purified using ion-exchange chromatography on a Carboxymethyl Sepharose column. Proteolytic activities of the purified enzyme were determined in 4 buffering conditions on casein, alpha lactalbumin, beta lactoglobulin and gelatin proteins. Results: Purified enzymes include two bands with molecular mass of 24 and 26 KDa. Results of proteolytic activity showed that ficin can digest casein. It has moderate hydrolytic activity on beta lactoglobulin and gelatin but ficin can not hydrolyze alpha lactalbumin. Conclusion: It seems ficin has selective effects on some proteins so it can be a good candidate for digestion of casein and making related drugs. (Sci J Hamadan Univ Med Sci 2013; 20 (2):125-131)