اثرات توام عصاره آبي زعفران و ميدان الكترومغناطيسي با فركانس پايين بر آنژيوژنز در پرده كوريوآلانتوييك جنين جوجه

The synergic effects of Saffron aqua extract and low frequency electromagnetic field on angiogenesis in chick chorioalantoic membrane

زمينه و هدف: مطالعات in vivo وin vitro بر اثرات ضد سرطاني زعفران تاكيد دارند. آنژيوژنز براي تكوين جنين و بسياري از وقايع فيزيولوژيكي و پاتولوژيك نظير رشد تومورها، ضروري است. همچنين بسياري از فرايندهاي رشد و نمو تحت تاثير ميدان‌هاي الكترومغناطيسي قرار مي‌گيرند. اين مطالعه با هدف بررسي اثرات توام عصاره زعفران و ميدان ‌‌الكترومغناطيسي با فركانس پايين برآنژيوژنز طراحي شد. روش بررسي: در اين پژوهش تجربي آزمايشگاهي تخم ‌مرغ هاي نطفه‌دار در 9 گروه شامل گروه‌هاي شاهد و شاهد آزمايشگاهي1 و 2، گروه‌هاي تجربي 1، 2 و 3 (تيمار با عصاره زعفران با غلظت هاي 100، 400 و 800 g/mlµ) و گروه‌هاي تجربي 4، 5 و 6 (تيمار توام عصاره زعفران همراه ميدان‌الكترومغناطيسي 400 گاوس) بصورت تصادفي تقسيم شدند. در روز دوم انكوباسيون، در شرايط استريل قسمتي از پوسته تخم‌مرغ‌ها برداشته شد و پنجره اي باز ايجاد گرديد. در روز هشتم 10 ميكروليتر از غلظت هاي مختلف عصاره به نمونه ها تيمار گرديد. در روز دهم تخم‌مرغ ها 4 ساعت در معرض ميدان ‌الكترومغناطيسي (فركانس 50 هرتز و شدت 400 گاوس) قرارگرفتند. در روز دوازدهم از تمامي نمونه‌ها به كمك فتواستريوميكروسكوپ عكس تهيه و تعداد و طول انشعابات عروقي محل تيمار روي پرده كوريوآلانتوييك به كمك نرم‌افزارImage J بررسي گرديد. نتايج با استفاده از آزمون هاي آماري ANOVA و تست تعقيبي Tukey تحليل شدند. يافته ها: ميانگين طول عروق خوني در گروه تجربي 1 نسبت به گروه شاهد كاهش معني داري نشان نداد (05/0P > ) در حالي كه در گروه‌هاي تجربي 2 و 3 كاهش معني داري مشاهده شد (001/0P < ). كاهش ميانگين تعداد عروق خوني در گروه‌هاي تجربي 1 (05/0P < )، 2 و 3 (001/0P < ) نسبت به گروه شاهد معني دار بود. مقايسه طول انشعابات گروه شاهد با شاهد آزمايشگاهي 2، كاهش چشمگيري نشان داد (001/0P < ). كاهش طول و تعداد عروق در گروه تجربي 4 (05/0P < ) و در گروه‌هاي 5 و 6 (001/0P < ) معني دار بود. نتيجه‌گيري: نتايج بيانگر آن است كه زعفران داراي اثر مهاري وابسته به دوز بر رگ‌زايي است و اين تاثير توسط ميدان‌الكترومغناطيسي با فركانس پايين و شدت 400 گاوس افزايش مي يابد.

Background and aims: Studies both in vivo and in vitro shows anti-cancer effects of saffron. Angiogenesis is required for many physiological and pathological conditions such as tumor growth. On the other hand, many processes are affected by electromagnetic fields. In this study the synergic effects of saffron aqua extract and low-frequency electromagnetic field on angiogenesis were investigated. Methods: In this laboratory experimental study, ross fertilized eggs were divided in to 9 groups, including: control, first and second sham groups. 1, 2 and 3 experimental groups (treated by the saffron extract in concentrations as 100, 400 and 800 µg/ml) and experimental groups, 4, 5 and 6 (treatment with saffron with the same concentrations which exposed on 400 gauss intensity electromagnetic field). In the second day of incubation, a window was open on each egg in sterile condition and on the eighth day, 10 µl of saffron extract was injected. In the tenth day in 2 sham groups and 4، 5 and 6 experimental groups. The eggs were exposed on electro-magnetic field for 4 hours. At last in the twelfth day all cases were photographed by photo stereomicroscope and the numbers and lengths of vessels around the sponges were measured by Image J software. Data were analyzed by SPSS and statistic tests such as Tukey & ANOVA. Result: Average length of blood vessels in the experimental group 1, compared with the control group showed no significant decrease (P > 0.05), while in experimental group 2 and 3 it was significantly increased (P < 0.001). The average number of blood vessels in the experimental group 1, 2 and 3 declined noticeably compared with the control group (P < 0.05). Comparing of branches in blood vessels in second sham group with the control group showed dramatic reduction (P < 0.001). The number of blood vessels and length of branches in the experimental 4 group significantly decreased (P < 0.05), while this reduction in the fifth and sixth group were significant (P < 0.001). Conclution: The aqueous extract of saffron has dose dependently inhibitory effect on angiogenesis which influences by low-frequency electromagnetic field with 400 Gauss intensity significantly.