فراواني ايزوله‌هاي اشريشيا كلي مولد آنزيم بتالاكتاماز وسيع الطيف TEM در نمونه‌هاي باليني با روش‌هاي فنوتيپي و مولكولي در زنجان

Frequency of TEM Extended Spectrum Beta Lactamase Producing Escherichia coli in Clinical Specimens by Phenotypic and Molecular Methods in Zanjan

زمينه و هدف: توليد آنزيم‌هاي بتالاكتاماز وسيع الطيف از جمله آنزيم TEM (Temoneria) يكي از دلايل بروز مقاومت دارويي در ايزوله‌هاي اشريشيا كلي مي‌باشد. آنزيم TEM پلاسميدي بوده و انتشار گسترده‌اي بين باكتري‌هاي روده‌اي دارد. هدف از اين مطالعه بررسي فراواني ايزوله‌هاي اشريشيا كلي مولد بتالاكتاماز وسيع الطيف TEM در نمونه‌هاي باليني جدا شده از بيمارستان‌هاي شهر زنجان با دو روش فنوتيپي و PCR مي‌باشد. روش بررسي: در اين مطالعه‌ي توصيفي مقطعي، 200 ايزوله‌ي اشريشيا كلي از نمونه‌هاي زخم، خون، ترشحات، ادرار و مدفوع از بيمارستان‌هاي‌ شهر زنجان طي سال‌هاي 1391-1390 جمع‌آوري گرديد. پس از تاييد ايزوله‌ها با تست‌هاي افتراقي، حساسيت آنتي‌بيوتيكي ايزوله‌ها با روش انتشار ديسك (Bauer-Kirby) طبق توصيه‌ي CLSI نسبت به 12 آنتي‌بيوتيك تعيين گرديد. براي بررسي وجود ESBLs در سويه‌هاي ايزوله شده، از روش ديسك تركيبي (Combined Disk) استفاده شد و با استفاده از روش PCR ژن bla TEM شناسايي گرديد. يافته‌ها: در اين مطالعه، 6/77 درصد ايزوله‌هاي اشريشيا كلي از نمونه‌هاي باليني ادرار جداسازي شدند. در بررسي حساسيت آنتي‌بيوتيكي سويه‌ها، بيشترين ميزان مقاومت در برابر آموكسي‌سيلين (35/71 درصد) مشاهده شد و تمامي سويه‌ها (100 درصد) در برابر ايمي‌پنم حساس بودند. از 200 سويه‌ي مورد بررسي، 66 سويه (33 درصد) مولد ESBLs بوده، از 66 سويه مولد بتالاكتاماز وسيع الطيف، 31 سويه (96/46 درصد) حامل ژن blaTEM بودند. نتيجه گيري: با توجه به اينكه در مطالعه‌ي حاضر حدود 15 درصد ايزوله‌ها حامل ژن bla TEM بودند، احتمالا آنزيم‌هاي بتالاكتاماز ديگري نيز در ايجاد مقاومت دخيل هستند .از آنجايي‌كه عوامل مقاومت برروي عناصر ژنتيكي متحرك قرار دارند، شناسايي سريع و رديابي اين سويه‌ها مي‌تواند نقش مهمي در جلوگيري از گسترش آن‌ها داشته باشد. واژگان كليدي: اشريشيا كلي، بتالاكتامازهاي وسيع الطيف، bla TEM ، واكنش زنجيره‌اي پليمراز

Background and objective: Extended Spectrum Beta lactamases (ESBL) such as TEM (Temoneria) is one of the bases of antibiotic resistance in Escherichia coli isolates. The aim of this study was evaluation of TEM Extended Spectrum Beta lactamase producing E. coli, in clinical samples isolated from Zanjan hospitals, by phenotypic and PCR methods. Materials and Methods: In this cross-sectional study 200 E.coli isolates were collected from the clinical specimens such as wound, blood, secretion, urine, and stool from Zanjan hospitals from 2011 to 2012. After identification of isolates by biochemical tests, the antibiotic susceptibility test (Kirby-Bauer method) was done according to CLSI advice against 13 antibiotics. The Combined Disk method was thencarried out for detection of ESBLs and thebla TEM gene was determined by a PCR method. Results: In this study, 77.6 % of E. coli isolates were collected from urine samples. The majority of the samples (71.35%) were resistant to Amoxicillin. By contrast, Imipenem was an effective antibiotic (100% susceptibility) against all isolates. From the total of 200 isolates, the extended spectrum beta-lactamase was detected in 66 (33%) of the strains,only about half of whichwere positive for thebla TEM gene. Conclusion: As only about 15% of the isolates were positive forthebla TEM gene,it is likely that other beta-lactamase enzymes cause the antibiotic resistance. Because resistance agents exist on mobile genetic elements, a rapid detection of these strains couldhelpto prevent their distribution. Keywords: Escherichia coli, Extended expectrum Beta-lactamase, bla TEM, PCR