اثر هيستامين بر سلول‌هاي دندريتيك پالس شده با پروتيين بازي ميلين و پاسخ سلول‌هاي T اتولوگ در شرايط in vitro

The Effect of Histamine on Dendritic Cells Pulsed with Myelin Proteins and Autologous T Cell Response in Vitro

چكيده زمينه و هدف: نقش سلول‌هاي دندريتيك در هدايت پاسخ‌هاي ايمني باعث شده تا از اين سلول‌ها در درمان بيماري‌هاي خود ايمن مانند مولتيپل اسكلروزيس استفاده شود. هدف اين مطالعه بررسي اثر هيستامين سلول‌هاي دندريتيك پالس شده با پروتيين بازي ميلين و پاسخ سلول‌هاي T اتولوگ در شرايط in vitro بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي از 5 فرد داوطلب نمونه‌گيري انجام شد و سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي با استفاده ازفايكول جدا شدند. سلول‌هاي دندريتيك ازسلول‌هاي خون محيطي با استفاده از سايتوكاين‌هاي GM-CSF و IL-4توليد شدند و بعد از تحريك شدن با پروتيين بازي ميلين در حضور هيستامين در گروه تيمار و بدون هيستامين در گروه كنترل بالغ شدند. با استفاده از دستگاه فلوسايتومتري، شاخص CD14 و شاخص‌هاي سطحي در سلول‌هاي دندريتيك سنجيده شد. مقادير سايتوكاين‌هاي IL-10 و IL-12 در كشت سلول‌هاي دندريتيك و IL-4، و IFN-? در كشت توامان سلول‌هاي دندريتيك و سلول T اتولوگ آن به دست آمد. ميزان تكثير لنفوسيت‌هاي T در گروه كنترل و تيمار مقايسه شدند. داده‌ها با آزمون‌هاي آماري تي دانشجويي و آناليز واريانس يك طرفه تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: در گروه تيمار بيانCD83 (از 3/15 به 5/24درصد) و HLA-DR (از 3/26 به 38درصد) نسبت به گروه كنترل افزايش معني‌داري را نشان داد(05/0p < ). بيان CD14 كاهش را نشان نداد. ترشح IL-10 افزايش و IL-12 كاهش را نشان داد. نسبت IL-4/IFN-? نسبت به گروه كنترل افزايش معني‌داري را نشان داد(05/0p < ). نتيجه‌گيري: هيستامين با انحراف پاسخ‌هاي ايمني از سمت TH1/TH17 به سمت TH2 در مدل آزمايشگاهي مولتيپل اسكلروزيس مي‌تواند به عنوان يك روش نوين در ساخت واكسن‌هاي با پايه سلول‌هاي دندرتيك در درمان بيماري مفيد باشد.

Background & aim: The role of dendritic cells in the immune responses has led to the application of these cells in autoimmune diseases such as multiple sclerosis. The aim of this study was to investigate the effect of histamine on dendritic cells pulsed with myelin proteins and autologous T cell response in vitro. Methods: In this experimental study, blood samples were taken from 5 volunteers. Subsequently, peripheral blood mononuclear cells were isolated by using Phicole Hypaque. Using GM-CSF cytokine and IL-4, dendritic cells were produced from peripheral blood and then stimulated with MBP in the presence and without histamine in control and treated group to be matured. The CD14+ and surface markers of resulted DC were evaluated by Flowcytometry. The levels of cytokines IL-10 and IL-12 in dendritic cells culture and IL-4, and IFN-? in both cultured dendritic cells and antilogous T cells were obtained. And then the proliferation of T lymphocytes in the treatment and control groups were compared. The collected data was analyzed by Studentʹs t-test and ANOVA. Results: In the treatment group, the expression of CD83 (from 3/15 to 5/24%) and HLA-DR (from 3/26 to 38%) was significantly higher than the control group (P > 0.05). The expression of CD14 exhibited no change. The secretion of IL-10 increased and IL-12 showed a decrease. The secretion of IL-4/IFN- ? showed an increase in treated group than the control group (P ? 0/05). Conclusion: Histamine deviation with immune responses from TH1/TH17 to the TH2 in an experimental model of MS can be used as a new method of DC-based vaccines which may be useful in treating this disease. Key words: Denderitic Cells, Myelin Basic Protein (MBP), Histamine, Multiple sclerosis (MS)