همسانه سازي ژنوم هاي كامل و قطعات بزرگ DNA

Cloning of Large DNA Fragments and Whole Genomes

همسانه سازي قطعات بزرگ DNA در خيلي از موارد براي مطالعه دقيق تر قطعات كلون شده ضروري است از اين رو تلاش هاي زيادي براي همسانه سازي قطعات برزرگ DNA يي و حتي ژنوم هاي كامل صورت گرفته است . مطالعات صورت گرفته نشان مي دهد كه با بهره گيري از روش هاي معمول ژنتيكي مي توان اين قطعات بزرگ و حتي ژنومهاي كامل اندامكي ، باكتريايي و ويروسي را همسانه سازي نمود .اين كار مي تواند از طريق همسانه سازي قطعات ژنومي همپوشان كه در نهايت از طريق نوتركيبي، ژنوم كامل را ايجاد مي نمايند و يا همسانه سازي پيوسته ژنوم كامل صورت گيرد. قطعات ژنومي ممكن است از طريق فرآيندي موسوم به inch worm elongation و از طريق جايگاههاي نشست موسوم به LPA و يا به طور مستقيم از طريق نوتركيبي وارد حامل شده و به ميزبان انتقال مي يابند. ژنوم كامل نيز به كمك حامل هاي ويژه طراحي شده وارد ژنوم ميزبان گردد.كار هاي انجام شده نشان مي دهد با بهره گيري از حامل هاي اختصاصي مناسب و فرآيند هاي معمول ژنتيكي نظير نوتركيبي و يا تبديل ژني كه در ارگانيسم هاي زنده صورت مي گيرد و همچنين توانايي ترانسپوزون ها و عناصر دخولي در اين زمينه ، مي توان به اين مهم اقدام نمود.

Cloning of large DNA fragments is necessary for more accurate analysis of cloned fragments. Therefore, there have been many attempts for cloning of large DNA fragments and whole genome. Earlier studies have showed that cloning of large DNA fragments and whole genome of organelles, bacteria and viruses is possible by using standard molecular biology techniques such as overlapping DNA fragments and whole genome cloning techniques. Genomic fragments can be inserted into the specific vectors by several strategies, such as inchworm elongation process and simultaneous homologous recombination at two small flanking DNAs called landing pad sequences (LPS), or direct recombination and transformation into the host genome. Also, whole continuous genomes can be inserted to the host genome by specific designed vectors. For achieve this purpose, common processes in live organism such as recombination, gene conversion, and also transposons and insertion sequences capabilities can be benefitted from in this regard, using suitable specific vectors.