بررسي ارزش تشخيصي كشت در رده هاي سلولي ومقايسه آن با تست الايزا در عفونت هاي سيتومگالوويروس در موارد سقط جنين

Comparative study of tissue culture and ELISA methods for cytomegalovirus infection diagnosis in abortions

سابقه و هدف: با وجودي كه كشت گلبولهاي سفيد مادر دررده هاي سلولي و شناسايي انكلوزيون هاي ويروس روش تشخيصي ارزشمندتري در بيماران مبتلا به سيتومگالوويروس است، اما براي تشخيص عفونت سيتومگالوويروس، از تست الايزا و سنجش آنتي بادي هاي ضد سيتومگالوويروس استفاده مي شود. در اين مطالعه، هدف ما بررسي ارزش تشخيصي اين دو روش براي شناسايي موارد عفونت سيتومگالوويروس در مادر و نقش احتمالي آن در سقط جنين مي باشد . روش بررسي: در اين پژوهش كه از نوع ارزيابي آزمون هاي تشخيصي است، آنتي بادي هاي ضد سيتومگالوويروس به روش الايزا بررسي شد. هم چنين 5 ميلي ليتر خون سيتراته مادر در فلاسك هاي كشت رده سلولي فيروبلاستي MRC5 تليقح گرديد و بعد از 72 ساعت از نظر تشكيل اجسام انكلوزيون داخل سلولي بررسي شد. نمونه هاي مثبت انتخاب گرديد و به روش PCR از نظر حضور اسيدنوكلييك سيتومگالوويروس تاييد شد. يافته ها: 118 مادر با سابقه سقط جنين بررسي شدند. در 6 مورد (1/7%) تست الايزا و يا كشت سلول از نظر عفونت سيتومگالوويروس مثبت بود كه همگي سقط بار اول بودند. در كشت سلولي، 6 مورد انكلوزيون داخل سلولي مشاهده شد كه فقط 4 مورد آن در آزمون PCR، از نظر وجود اسيدنوكلييك سيتومگالوويروس تاييد شد. درتست الايزا، 2 مورد افزايش تيتر سرمي آنتي بادي كلاس IgM بر ضد سيتومگالوويروس يافت شد و در مجموع 6 مورد ابتلا به عفونت سيتومگالوويروس تشخيص داده شد . نتيجه گيري: تست الايزا و روش كشت در رده هاي سلولي، هيچكدام به تنهايي براي تشخيص عفونت سيتومگالوويروس مادر كافي نيستند. احتمالاً عفونت سيتومگالوويروس با سقط جنين تكراري رابطه اي ندارد و ترجيحاً در سقط هاي بار اول ديده مي شود .

Background: Primary infection of cytomegalovirus especially in first and second trimester of pregnancy causes severe tissue injury and congenital abnormalities. Infection in third trimester of pregnancy has a higher chance of transmission but less tissue injury. Elisa method is a simple test for diagnosis of serum antibody but blood lymphocytes culture is a better and more specific diagnostic method than Elisa. In this study we compared Elisa and tissue culture methods for the diagnosis of congenital cytomegalovirus infections. Materials and methods: In this study 5 ml of blood obtained from mothers who aborted their fetuses. Then serum antibody was titrated by ELISA method. Moreover, 5ml of citrated blood with 2 ml of Ficohl hypaque centrifuged in 3000 g and buffy coat layer of leukocytes was separated. These cells cultured in MRC5 fibroblast cell line and were assessed for intracellular inclusion bodies after 72 hours. Positive samples were selected and tested for nucleic acids of cytomegalovirus with PCR method. Results: In this study, 118 cases of abortion were included. In tissue culture method, 6 samples (7.2%) had intracellular inclusion body. Of these samples only 4 had cytomegalovirus nucleic acid by PCR method. Two cases showed increasing anti-cytomegalovirus IgM with ELISA but they were negative by tissue culture method. In general, 6 cases (7.2%) of cytomegalovirus infection were diagnosed. Conclusion: ELISA and tissue culture methods should be performed together. Cytomegalovirus infection has not likely any relation with habitual abortion and is seen in first time abortions preferably.