بررسي ويروس لكه زرد زنبق (IYSV) در پياز و برخي از گياهان زينتي بررسي ويروس لكه زرد زنبق (IYSV) در پياز و برخي از گياهان زينتي با استفاده از روش‌ الايزا و RT-PCR در استان خراسان رضوي

Detection of Iris Yellow Spot Virus (IYSV) in Onion and some of Ornamental Plants by ELISA and RT-PCRmethods in Khorasan Razavi Provinces

به منظور بررسي ويروس لكه زرد زنبق Iris yellow spot viruse در تابستان سال 1387 از مزارع پيازكاري و گلخانه‌هاي توليد گياهان زينتي در استان خراسان رضوي نمونه‌برداري صورت گرفت. تعداد 435 نمونه از مزارع پياز و تعداد 142 نمونه از گياهان زينتي (رز، گلايول، زنبق، شمعداني، داوودي بگونيا، اطلسي، و ميخك) جمع‌آوري شد. گياهاني كه داراي علايم كلروز، نكروز و لكه‌هاي برگي بودند در شرايط خنك به آزمايشگاه انتقال داده شدند. سپس به وسيله آزمون سرولوژيكي DAS-ELISA مورد بررسي قرار گرفت و عصاره گياهاني كه مثبت ارزيابي شدند به 4 گونه محك كاشته شده در گلخانه,Nicotiana rustica (بدشكلي برگ كلروز سيستميك و نكروز) N. benthamiana N clevelandii ,N.tabacum var. Samson (كلروز سيستميك و نكروز) مايه زني گرديد. سپس گياهان مايه زني شده به وسيله آزمون DAS-ELISA آزمايش شدند، عصاره گياهان محك مثبت به 4 رقم پياز شامل زرد نيشابور، سفيد نيشابور، قرمز درگز و قرمز درچه اصفهان مايه زني گرديد كه علايمي شبيه به علايمي كه در پيازهاي آلوده در مزرعه مشاهده شده بود، در اين گياهان پديدار شد. جهت بررسي مولكولي ويروس، استخراج RNA از گياهان محك‌ و پياز‌هاي آلوده، از دو روشPEG 6000 و استفاده از كيت (plus)RNX™ انجام شد و با استفاده از آغازگر اختصاصي مبني بر ژن كد كننده پروتيين پوششي در واكنش RT-PCR قطعه‌اي در محدوده 181 و 139جفت باز تكثير گرديد. نتايج آزمون DAS-ELISA نشان داد كه تمام مزارع پياز به نسبت‌هاي مختلفي به اين ويروس آلوده بوده و بيماري از شيوع بالايي برخوردار است. IYSV در 107 نمونه پياز ، 7 نمونه گل داوودي و يك نمونه گل زنبق شناسايي شد. اين اولين گزارش از وجود اين ويروس در مزارع پياز و گل داوودي در ايران مي‌باشد.

In order to investigate the Iris yellow spot virus (IYSV) Sampling from onion fields and greenhouse of Khorasan Razavi province in summer of 2009 was done. Totally 435 samples were collected from this onion fields and 142 from ornamental plants (Rose, Gladiol, Iris, Plargonium, Chrysanthemum, Begonia, Petonia and Carnation). The plants that had symptoms such as chloratic, necrotic and diamond shape lesions were collected and transferred under cold condition to labratory then tested by DAS-ELISA and the sap of posetive plants inoculated to 4 coultivar of indicator plants that cultivated in greenhouse Nicotiana rustica (leef deforming and systhemic chloratic and necrosis),N. benthamiana, N. clevelandii, N.tabacum var Samson (systhemic chloratic and necrosis) then the inoculated indicator plants tested by DAS-ELISA, sap of positive indicator plants inoculated to 4 cultivars of onion include in yellow of Neishabour, white of Neishabour, red of Dargaz, red of dorche of Isfahan. The symptoms similar to the symptoms on infected onion in the fields appeared in their plants. For molecular detection, RNA extraction was done by PEG6000 Precipitation and RNX ™)plus ( kit.In RT-PCR tests, specific primers designed for nocleoprotein gene amplified 181 bp and 139 bp fragments.. DAS-ELISA test results have indicated that all of the onion fields were infected with the virus in various rates. IYSV has been detected in 107 samples of onion, 7 samples of chrysanthemum floweres and 1 sample of iris floweres. This is the first repot of Iris yellow spot virus on onion and chrysanthemum in Iran.