جداسازي و بررسي خصوصيات فنوتيپي و مولكولي ژن‌هاي متالوبتالاكتاماز گونه هاي سودوموناس آيروژينوزا جدا شده از نمونه هاي باليني بيمارستان وليعصر زنجان

چكيده زمينه و هدف : عفونت توسط سودوموناس آيروژينوزا درتمام جهان گسترش يافته است و گزارشات مكرر انتشار متالوبتالاكتامازها نشان از سرعت رو به رشد آن دارد. هدف از اين مطالعه تعيين حساسيت آنتي بيوتيكي و تشخيص ژن هاي متالوبتالاكتاماز (MBLs) از نوع IMP و VIM در سودوموناس آيروژينوزاي ايزوله شده ازانواع نمونه هاي باليني استان زنجان مي باشد. روش بررسي : تعداد 70 ايزوله ي سودوموناس آيروژينوزا از بيماران بستري در بخش مراقبت هاي ويژه، پس از انجام آزمايشات ميكروبي و بيوشيميايي تعيين هويت شدند. الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي نمونه هاي تاييد شده به روش كايربي بوير تعيين گرديد. سپس سويه هاي توليد كننده ي متالوبتالاكتاماز به روش فتوتيپي( DDST) شناسايي شدند. از نظر ژنوتيپي ژن هاي متالوبتالاكتاماز VIM،IMP1 وIMP در سويه هاي فوق باروش PCR بررسي گرديدند و ايزوله هاي MBL مثبت از نظر وجود ژن حمل كننده‌ي اينتگرون كلاس1(INI1) مورد بررسي قرار گرفتند. يافته ها : از 70 سويه ي يافت شده سودوموناس آيروژينوزا به روش فتوتيپي بيشترين مقاومت آنتي بيوتيكي در ايزوله ها به ترتيب: مروپنم، سفوتاكسيم، سفتازيديم، ايمي پنم، جنتامايسين، پيپراسيلين و سيپروفلوكساسين بود. در آزمون DDS مشخص گرديد كه از 44 ايزوله مقاوم به ايمي پنم تنها 36 ايزوله توليد كننده ي آنزيم متالوبتالاكتاماز هستند. با انجام آزمون PCR 33 سويه ي توليد كننده ي MBLS فتوتيپ مثبت، تاييد شدندكه 23 ايزوله حاوي ژن VIM(2/52%) و10 ايزوله حاوي ژن IMP (3/22%) بودند كه 8 سويه ازآن، از نوع IMP1 (2/18%) بودند.همچنين مشخص گرديدكه از 44 سويه ي مقاوم به ايمي پنم تنها 31 ايزوله (5/70%) داراي كلاس1 اينتگرون بودند. نتيجه گيري :نتايج نشان مي دهدكه مقاومت آنتي بيوتيكي به سبب توليدآنزيم متالوبتالاكتامازها روند رو به رشدي در منطقه مورد مطالعه داشته و در ميان سويه هاي توليدكننده MBLS، فراواني ژن هاي VIM بيشتر از IMPگزارش شد.

ABSTRACT Background and Aim: Infections caused by Pseudomonas aeruginosa and dissemination of metallo-beta-lactamases (MBL) have been reported with increasing frequency through-out the world. The aim of this study was to investigate the antibiotic susceptibility and identification of blaVIM and blaIMP genes in P. aeruginosa isolates in Zanjan Province. Material and Methods: A total of 70 P. aeruginosa isolates were identified from the patients at intensive care units (ICU) in Zanjan Province. The antimicrobial susceptibility was tested by disk diffusion (Kirby-Bauer) method and MBL producing strains were identified by double-disk synergy test (DDST). From genotypical point of view the presence of blaVIM and blaIMP genes and class 1 integron was confirmed by PCR. Results: Of 70 strains of P. aeruginosa detected by phenotypic method, the highest rate of resistance was found in the following order: meropenem, cefotaxime and ceftazidime, imepenem gentamicin, piperacillin, and ciprofloxacin.DDS test showed that of 44 resistant isolates to imepenem 36 (81.8%) were MBL producing. We found 33 MBL producing strains by PCR, 23 isolates had VIM gene (52.2%) and 10 isolates carried IMP gene (22.3%). The IMP gene in 8 of the 10 isolates was IMP1 (18.2%). Of 44 resistant strains to imepenem only 31 isolates (70.5%) had class 1 integron gene. Conclusion: Our results showed that prevalence of antibiotic resistance due to MBL production in our province is on the rise and among the MBL producing strains the frequency of VIM genes is higher than IMP genes. Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Metallo-beta-lactamases, Class 1 integron, PCR