بررسي مكانيسم مهاري تركيب اوژنيل آدامانتات نسبت به آنزيم 15- ليپواكسيژناز

Determination of the Inhibitory Mechanism of Eugenyl Adamantate on 15-Lipoxygenase

هدف: آنزيمهاي ليپواكسيژناز از دسته پروتيين هاي آهن دار غير همي هستند كه مسيول پراكسيداسيون اسيد هاي چرب غير اشباع در گياهان و حيوانات مي باشند. اهميت فعاليت اين آنزيمها در بدن پستانداران و نقش آنها در ايجاد حساسيت ها، التهابها و حتي تشكيل برخي از سرطانها به اثبات رسيده است. از اين رو مطالعه در مورد جزييات مكانيسمي اين دسته از آنزيمها و متابوليسم محصولات پراكسيدي آنها و همچنين سنتز مهار كننده هاي مناسب براي آنزيمهاي مذكور بسيار حايز اهميت مي باشد. دراين مقاله مكانيسم بازدارندگي يكي از مهاركننده هاي قوي آنزيم ليپواكسيژناز موسوم به اوژنيل آدامانتات كه به تازگي سنتز و مطالعه شده بود مورد بررسي واقع شده است. روش بررسي: در اين بررسي فعاليت ليپواكسيژنازي آنزيم 15- ليپواكسيژناز سويا در حضور مهاركننده اوژنيل آدامانتات به دو روش اسپكتروفوتومتري تشكيل دي ان مزدوج در طول موج 235 نانومتر و روش تشكيل پراكسيد با معرف هاي DMAB و MBTH در طول موج 592 نانومتر بررسي شد. يافته ها: در نتيجه آزمايشات انجام شده مشخص شد كه مهاركننده مذكور در دو دامنه غلظتي فعاليت آنزيم را پايين مي آورد و دو IC50 در محدوده 80 تا 120 نانومولار و 5 تا 13 ميكرومولار براي آن تعيين گرديد. بحث و نتيجه گيري: در نتيجه آزمايشات انجام شده مشخص شدكه مهاركننده مذكور در دو دامنه غلظتي فعاليت آنزيم را پايين مي آورد و دو IC50 در محدوده 80 تا 120 نانومولار و 5 تا 13 ميكرومولار براي آن تعيين گرديد. بررسي هاي سنيتيكي يك مكانيسم مهاري مختلط از رقابتي و غير رقابتي را براي اين تركيب نشان داد.

Introduction: Lipoxygenases are non-hem iron-containing proteins responsible for the peroxidation of the unsaturated lipids in animals and plants. The critical role of the enzymes in creating inflammations, sensitivities and some of the cancers has been demonstrated in mammalians. An investigation of the mechanism details of these category of enzymes and the metabolism of their peroxide products as well as the synthesis of appropriates inhibitors is of great importance for the mentioned enzymes. In this article, the inhibitory mechanisms of eugenyl adamantate which is a new synthetic potent inhibitor of lipoxygenase is studied. Methods: The lipoxygenase activity of soybean 15-lipoxygenase in the presence of eugenyl adamantate was assayed by using two spectrophotometric methods: the formation of conjugated dien in 235 nm and DMAB-MBTH peroxide in 592 nm. Results: The experiments show that the mentioned compound decreases the lipoxygenase activity in two concentration ranges of 80-120 nM and 5-13 µM. The kinetic studies show the mixed inhibitory mechanism including the competitive and non-competitive for this compound. Conclusion: The kinetic studies show the mixed inhibitory mechanism of the compound.