ترانسفورماسيون گياه شابيزك Atropa belladonna توسط Agrobacterium rhizogense

Agrobacterium rhizogense - mediated transformation of Atropa belladonna

چكيده شابيزك (Atropa belladonna) يكي از مهمترين گياهان دارويي خانواده سولاناسه مي باشد. اين گياه حاوي منابع آلكالوييدهاي تروپاني است. اين آلكالوييدها بيشتر درريشه ها بيوسنتز مي شوند. تحقيق حاضر به منظور افزايش ريشه هاي مويي شابيزك به روش انتقال ژن انجام شد. براي اين منظور از سويه آگروباكتريوم رايزوژنز (15843 AR) استفاه شد. ابتدا ريزنمونه هاي ساقه با سوسپانسيون آگروباكتريوم داراي ژن rolB تلقيح شدند. سپس جهت باززايي مستقيم از پنج تركيب (MS، KIN mg/l 3MS + ،B5، KIN mg/l 12 MS+ و mg/l KIN5 B5 +) در قالب طرح كاملاٌ تصادفي در سه تكرار استفاده شد. نتايج تجزيه آماري نشان داد كه سطح هورموني KIN mg/l 12+ MS بيشترين باززايي مستقيم از نوساقه را دارا مي باشد. براي آناليز گياهان تراريخت از دو روش فنوتيپي (مشاهده ريشه مويي از گياهچه تراريخت) و تكثير بخشي از ژن rolB (به روش PCR) استفاده شد.

Abstract Atropa belladonna is one of the most important medicinal plants in Solanaceae family. It contains tropani alkaloids that often are synthesised in root. Present study was conducted in order to induction of hairy root in A.belladonna using gene transfer via Agrobacterium rhizogenes method. The stem explants with Agrobacterium suspensions harbouring rolB gene were inoculated. Then, in order to direct regeneration, five compounds (MS, MS + 3 mg/l Kin , B5, MS+ 12 mg/l Kin, B5+ 5 mg/l Kin) ) in a completely randomized design with three replications was used. The statistical analysis indicated that among treated hormone, 12 mg /l KIN level in MS medium showed the most shoots direct regeneration. Two methods for the analysis of transgenic plants, phenotypic (observed in hair roots of transgenic seedlings), gene amplification of the rolB (using PCR) was used.