تاثير عصاره بافت غضروفي جنيني بر تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي به استيوبلاست

The Effect of Embryonic Cartilaginous Tissue Extract on Differentiation of Mesenchymal Stem Cells to Osteoblasts

تمامي سلول هاي بنيادي از دو گروه سلول هاي بنيادي جنيني و سلول هاي بنيادي بزرگسال منشا مي گيرند. مهمترين سلول هاي بنيادي بزرگسال، سلول هاي بنيادي مزانشيمي هستند. سلول هاي مزانشيمي سلول هايي پرتوان و غيرخونساز با قابليت خودنوزايي و پتانسيل تمايزي بالا مي باشند. اين سلول ها در مغزاستخوان و ساير بافت هاي اسكلتي وجود دارند. سلول هاي مزانشيمي از منشا مغزاستخوان قادرند به سلول هاي استيوبلاست، استيوسيت، چربي، غضروفي، تاندون و ماهيچه در شرايط in vivo و in vitro تمايز يابند. تمايز استيوبلاستي در آزمايشگاه نيازمند عوامل متعددي است تا شرايطي همانند ميكرومحيط بافت استخوان ايجاد كنند. در اين تحقيق اثر عصاره بافتي جنين موش 15 روزه در تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغزاستخوان به سلول هاي استيوبلاستي مورد مطالعه قرار گرفت. سلول هاي بنيادي مزانشيمي از مغز استخوان موش جدا شده و در فلاسك هاي حاوي محيطDMEM-F12 ، ?g/mL100 استرپتومايسين،IU/mL 100 پني سيلين و 10% FBS كشت شدند. سلول هاي بنيادي مزانشيمي با انجام عمل پاساژ خالص گرديده، سپس تحت تاثير عصاره بافت غضروفي جنين موش 15 روزه قرار گرفتند. پس از پايان كشت 21 روزه، براي تشخيص سلول هاي استيوبلاستي از رنگ آليزارين قرمز استفاده شد. پس از تاثير عصاره، سلول هاي بنيادي مزانشيمي دوكي شكل تغيير شكل داده و زوايد فراواني در هر سلول مشاهده گرديد. رنگ آميزي آليزارين قرمز تمايز سلو ل هاي بنيادي مزانشيمي به استيوبلاستي را نشان مي دهد. همچنين تمايز استيوبلاستي سلول هاي بنيادي مزانشيمي، فاكتورهاي مورفوژني و استيوژنز عصاره بافت غضروفي جنين موش 15 روزه را تاييد مي كند. اين نتايج تمايز استيوبلاستي سلول هاي بنيادي مزانشيمي را بيان مي كند، از اينرو مي توان در تمايز استيوبلاستي مدل هاي آزمايشگاهي و درمان بيماري هاي ژنتيكي استخوان به فراواني استفاده كرد.

All stem cells are originated from both embryonic stem cells and adult stem cells. The most important adult stem cells are mesenchymal stem cells. Mesenchymal stem cells are pluripotent and non-hematopoietic cells with a high differentiation potential. There are in the bone marrow and other skeletal tissues. Mesenchymal stem cells derived from bone marrow are capable differentiation to osteoblast, osteocyte, adipocyte, chondrocyte, tendons and muscle cells under in vivo and in vitro. In vitro osteoblastic differentiation needs to a variety of factors, which creates condition similar to bone tissue microenvironment. In this study, the effects of embryonic cartilaginous tissue extract was studied to differentiation of bone marrow mesenchymal stem cell into osteoblast. Mesenchymal stem cells were isolated from mice bone marrow and cultured in flasks containing DMEM-F12, 100 ?g/ml streptomycin, 100 U/ml penicillin and 10% FBS. Mesenchymal stem cells were purified by several passages, then cells were affected by 15day mouse cartilaginous tissue extraction. After 21 days of culture, Alizarin Red staining was used for the detection of osteoblastic cells. After effect of extraction, spindle-shaped mesenchymal stem cells change their shape And many appendages was observed in cells. Alizarin Red staining has shown osteoblastic differentiation of mesenchymal stem cells. Also osteoblastic differentiation of mesenchymal stem cells has confirmed morphogenic and osteogenic factors at cartilaginous tissue extracts of 15-day mouse embryo. the results express of osteoblastic differentiation of mesenchymal stem cells. Therefore, it is used in vitro models of osteoblast differentiation and genetic diseases of bone.