تعيين جمعيت نسبي سالمونلا در دستگاه گوارش طيور با استفاده از روش PCR

Determination of the Relative Population of Salmonella in Poultry Gastrointestinal Tract Using PCR Method

اين تحقيق با هدف تعيين جمعيت نسبي باكتري‌هاي جنس سالمونلا در بخش‌هاي مختلف دستگاه گوارش طيور با استفاده از روش PCR انجام گرديد. محتويات گوارشي جوجه‌ها خارج و DNA مربوطه استخراج شد. از واكنش زنجيره‌اي پليمراز و شيوه PCR براي بررسي جمعيت نسبي اين باكتري استفاده گرديد. با استفاده از يك آغازگر اختصاصي، باند اختصاصي مربوط به اين باكتري و با استفاده از يك آغازگر عمومي باند اختصاصي كل باكتري‌هاي دستگاه گوارش به‌دست آمد. سپس به كمك تكنيك PCR، جمعيت نسبي باكتري‌هاي جنس سالمونلا نسبت به كل باكتري‌هاي دستگاه گوارش تعيين گرديد. تجزيه و تحليل نتايج حاصل نشان داد كه از كل باكتري‌هاي دوازدهه و ژيوژنوم به ترتيب 12/0 و 11/0 درصد متعلق به جنس سالمونلا بودند. همچنين از كل باكتري‌هاي موجود در ايليوم و روده كور هم به ترتيب 16/0 و 39/0 درصد كل باكتري‌ها از گروه سالمونلاها بودند. علاوه بر اين در چهار، چهارده و سي روزگي، به ترتيب 38/0، 18/0 و 06/0 درصد كل باكتري‌هاي دستگاه گوارش جوجه‌ها، باكتري‌هاي جنس سالمونلا بودند. علاوه بر اين معلوم شد در چهار روزگي در دوازدهه، ژوژنوم، ايليوم و روده كور به ترتيب 28/0، 11/0، 16/0 و 91/0 درصد كل باكتري‌ها از جنس سالمونلا بودند. بنابراين مي‌توان بيان كرد جمعيت نسبي اين باكتري‌ها در بخش‌هاي تحتاني روده (ايليوم و روده كور) نسبت به بخش‌هاي فوقاني روده باريك بيشتر است. نتايج حاصل نشاندهنده متغير بودن جمعيت باكتري‌هاي جنس سالمونلا در بخش‌هاي مختلف دستگاه گوارش طيور بود كه با عملكرد، وظايف و محيط فيزيكوشيميايي اين بخش‌ها مرتبط است.

This study was conducted in order to determining of relative population of Salmonella spp. in various parts of poultry gastrointestinal tract using semi- quantitative PCR technique. It was removed gut contents and extracted their DNA. It is used polymerase chain reaction (PCR) and semi- quantitative PCR technique for investigation on relative population of these bacteria. It was obtained a specific band for detecting of mentioned bacterium using a set specific primer and also a specific band for detecting of all bacteria. Then, it was determined relative population of Salmonella spp. relative to total gut bacteria using semi- quantitative PCR technique. Result analysis was showed Salmonella spp. consists 0.12% and 0.11% of total duodenum and jejunum bacteria respectively. Also it was showed Salmonella spp. consists 0.16% and 0.39% of total ileum and cecum bacteria respectively. Meanwhile Salmonella spp. consists 0.38%, 0.18% and 0.06% of total intestine bacteria at 4, 14 and 30 day of ages. Furthermore it was showed at 4 day of ages Salmonella spp. consists 0.28%, 0.11%, 0.16% and 0.91% of total bacteria in duodenum, jejunum, ileum and cecum respectively. Thus it can state relative population of Salmonella spp. in lower parts i.e. ileum and cecum were higher than upper parts i.e. duodenum and jejunum. Obtained results showed Salmonella spp. populations were variable in various intestine parts and correlated with functions and physicochemical conditions of intestine parts.