تغيير همزمان اسيدآمينه هاي Trp258 به Cys و His259 به Tyr در پروتيين ريبوزومي L3 در جهت افزايش تحمل به توكسين DON درگياه تراريخت توتون

Simultaneous Changes of Trp258 to Cys and His259 to Tyr in Ribosomal Protein L3 in order to Increase Tolerance to Fusarium Toxin DON in Transgenic Tobacco

يكي از مكانيسمهايي كه در جهت كاهش تاثيرات توكسينداكسينيوالنون DON شناسايي شده، دستورزي جايگاه هدف آن پروتيين ريبوزومي L3 (RPL3) ميباشد. در اين پژوهش دو تغيير نقطه‌اي (اسيدآمينه شماره 258 از تريپتوفان به سيستيين و شماره 259 از هيستيدين به تيروزين) در توالي cDNA ژن RPL3 گوجه‌فرنگي با استفاده از تكنيك جهش‌زايي با جايگاه مشخص (SDM) انجام پذيرفت. گياه مدل توتون تراريخت با LeRPL3ي دست‌ورزي‌شده از نظر توانايي باززايي و توليد كالوس در حضور توكسين DON مورد آزمايش قرار گرفت. تفاوت‌هاي قابل توجهي از نظر توانايي توليد كالوس و باززايي در حضور DON در لاين‌هاي تراريخت در مقايسه با شاهد غيرتراريخت مشاهده گرديد. در بين جهش‌هاي منفرد، در گياهان حاوي LeRPL3H259Y پاسخ مقاومت به DON بهتري از خود نشان دادند. نتايج نشان مي‌دهد كه بيان AYT1 و پروتيين RPL3 دست‌ورزي‌شده مي‌توانند در القاي تحمل به DON و به دنبال آن افزايش مقاومت به بيماري FHB در گياهان ميزبان موثر باشند.

Another mechanism for reduction the effects of deoxynivalenon toxin (DON) is target site (RPL3 protein) manipulation. In this study amino acid residue 258 is changed from tryptophan to cyctein and 259 from histidine to tyrosine in tomato ribosomal protein L3 (LeRPL3) cDNA through Site Directed Mutagenesis (SDM). Transgenic tobacco plants expressing these modified LeRPL3 cDNAs were tested for ability of leaf discs to regenerate and produce callus in the presence of DON. Significant differences in callus induction and ability to undergo regeneration was seen in transformed lines as compared to non-transformed tobacco plants in DON assays. Among the mutant types, marked difference with respect to resistance against DON was observed with regenerants expressing LeRPL3WC/HY; and plants expressing LeRPL3H259Y giving better response than transforments expressing LeRPL3W258C. The results indicate the possibility of increase in DON tolerance (and Fusarium head blight resistance respectively) among the plants based on expression of engineered RPL3.