شناسايي گونه‎هاي كمپيلوباكتر در مدفوع سگ‎ها و گربه‌هاي به ظاهر سالم با استفاده از واكنش زنجيره‌اي پلي مراز چندگانه (M-PCR)

Identification of campylobacter SPP. in apparently healthy dogʹs and catʹs stool by multiplex PCR

كمپيلوباكتريوزيس بيماري مشترك بين انسان و دام محسوب مي شود و در بعضي موارد حيوانات حامل باكتري، منشا عفونت براي انسان، مي باشند. سگ و گربه‏هاي آلوده ممكن است بدون علايم باليني بوده ولي باكتري را از خود دفع ‏نمايند و گاهي هم علايم باليني (نظير اسهال) در آن ها ديده مي شود. به همين دليل تشخيص سريع و دقيق حيوانات آلوده اهميت دارد. هدف اين تحقيق تعيين ميزان آلودگي به كمپيلوباكتر بوسيله آزمايش مولتيپلكس PCR در نمونه مدفوع سگ و گربه‏هاي ارجاعي به بيمارستان‏هاي دام كوچك شهر تهران بوده است. در اين مطالعه، 100 نمونه مدفوع سگ و گربه اهلي در شهر تهران بررسي شد. پرايمرهاي مورد استفاده، براي جستجوي توالي‏هاي اختصاصي در ژن‏هاي 16S rRNA ، gly A، mapA و lpxA كمپيلوباكتر انتخاب شدند. ابتدا با استفاده از يك جفت پرايمر يونيورسال مواردي كه حاوي توالي نوكليوتيدي خاص جنس كمپيلو باكتر بود، شناسايي و سپس با روش مولتي پلكس PCR تعيين هويت گونه‏ها انجام شد. در مجموع تعداد 39 نمونه به عنوان آلوده به كمپيلوباكتر شناخته شدند كه از اين 39 نمونه، 2 نمونه متعلق به گونه كمپيلوباكتر ژژوني و 11 نمونه كمپيلوباكتر آپسالانسيس بود. تحليل آماري نشان داد كه ابتلا به كمپيلو باكتر آپسالانسيس در گربه نسبت به سگ بيشتر است (p?0.05). نتايج بررسي نشان داد كه مي توان از روش PCR به عنوان روش تشخيصي سريع براي شناسايي باكتري هاي جنس كمپيلوباكتر و گونه‏هاي متعلق به آن در نمونه مدفوع حيوانات بيمار يا حامل استفاده كرد.

Campylobacteriosis is considered as a zoonotic disease and in some cases carrier are the sources of infection in humans. Dogs and Cats might have no Clinical signs but shed the bacteria in their feces and sometimes show samples of dogs and cats were examined. Primers were used related to 16S rRNA, gly A, mapA, and lpxA genes. First, positive samples which contained nucleotide sequence related to Campylobacter spp. were identified using universal Clinical sign (such as enterits). Therefore the rapid and accurate diagnosis of infected animals is important. The objective of the present study was to detection of Campylobacter species in stool samples of dogs and cats referred to small animal hospitals in Tehran, Iran, using Multiplex PCR technique. In the present study 100 stool primers. Then identification of Campylobacter spp. was performed using multiplex PCR. PCR products were analyzed and scanned using gel electrophoresis and UV illuminator, respectively. Thirty nine samples were positive for Campylobacter spp. Of these, 2 and 11 samples were related to Campylobacter jejuni and Campylobacter upsaliensis, respectively. Statistical analysis was showed that Campylobacter upsaliensis infection was more common has a higher prevalence in cats compared to dogs. It was concluded that PCR technique can be used as a useful test for rapid diagnosis of Campylobacter spp. in stool samples of diseased or carrier animals.