بررسي ميزان آلودگي سگ‌هاي خانگي به جنس كمپيلوباكتر با استفاده از تكنيكpcr

A survey of the Genus Campylobacter contamination in domestic dogs using PCR technique

در طي 30 سال گذشته، كمپيلوباكتر به عنوان شايعترين عامل باكتريال گاستروانتريت انسان در كشورهاي توسعه يافته مطرح بوده است. در اين ميان سگ ها به عنوان ناقلين بدون علامت، نقش مهمي در انتقال اين باكتري به انسان دارند. به همين دليل و با توجه به مشكلات جداسازي باكتري تشخيص سريع و دقيق حيوانات آلوده مهم است. در اين بررسي طي پاييز سال 1390، نمونه گيري از مدفوع 60 سگ سالم خانگي در شهركرد انجام گرفت. بعد از استخراج DNA از نمونه هاي مدفوع، ابتدا توسط يك جفت پرايمر يونيورسال موارد مثبت كه حاوي توالي نوكليوتيدي خاص (توالي‏هاي اختصاصي در ژن‏هاي 16s rRNA ) جنس كمپيلو باكتر بود، شناسايي شد و سپس با تكنيك PCR، شناسايي گونه شايع كمپيلوباكتر در سگ (كمپيلوباكتر ژژوني) كه در انسان بسيار بيماري زاست انجام گرفت. از مجموع 60 نمونه مدفوع سگ، 18 مورد (30 درصد) آلوده به كمپيلوباكتر بودند كه از اين ميان كمپيلوباكتر ژژوني 33/8 درصد (5 مورد) از آلودگي ها را به خود اختصاص داد. با استفاده از نرم افزار SPSS با روش آنوواي يك طرفه نشان داده شد كه ميزان موارد آلودگي به كمپيلوباكتر در بين سگ‌ها به صورت معني داري زياد مي باشد. نتايج بررسي نشان داد كه مي‌توان از تكنيك PCR به عنوان روش تشخيصي سريع براي شناسايي باكتري هاي جنس كمپيلوباكتر و گونه‏هاي متعلق به آن در نمونه مدفوع حيوانات بيمار يا حامل استفاده كرد، بدون اينكه نيازي به كشت ميكروبي و استفاده از آنتي‌بادي‏هاي متعدد و گرانقيمت باشد.

During the past 30 years, the Campylobacter has been the most common cause of gastroenteritis in developed countries. Dogs as asymptomatic carriers play an important role in transfering of bacteria to human. Therefore, rapid and accurate diagnosis of carrier animalsis important. During the autumn months of 2011 in Shahr-e-Kord city a total of 60 stool samples from healthy domestic dogs, in order to detection of Campylobacter were collected. After extraction of DNA from the stool samples, positive samples which contain nucleotide sequence related to Campylobacter spp. were identified using universal pair primers. Then identification of common species Campylobacter in dog (C.jejuni) which is highly pathogenic for humans was performed using PCR techniqe.Out of 60 samples, 30% (18 Case) were positive due to Genus Campylobacter. Hereof, Campylobacter jejuni allocated 8.33% (5 out of 18) of this Pollution. SPSS analysis was revealed that prevalence of Campylobacter is Significantly high in young dogs. This study showed that PCR technique can be used as an useful test for rapid diagnosis of Campylobacter spp. in stool samples of dog carriers or patients without the culture and expensive variety of Anibodies.