تعيين گونه هاي مولد ليشمانيوز جلدي ايزوله هاي مختلف جدا شده از بيماران مراجعه كننده به بيمارستان رازي، تهران، سال 1389 با استفاده از ژن ITS1 و آنزيم Apo1 با روش ملكوليPCR-RFLP

چكيده مقدمه: ليشمانيوزيس از بيمــاري هاي مهم بومي در ايران است و به دو نوع جلدي و احشايي ديده مي شود. از آن جايي كه تعيين گونه اين انگل در كنترل و پيش گيري بيماري موثر است، لذا اين مطالعه با هدف تعيين گونه ليشمانيوز جلدي طراحي و اجرا گرديد. مواد و روش ها: در اين مطالعه از 35 بيمار مبتلا به ليشمانيازيس جلد 18 مورد آلودگي از اصفهان(حاشيه اطراف اصفهان، اردستان، كاشان و سميرم) 2 مورد از كرمان(كانون آلودگي سيرجان) 4 مورد خراسان(2 مورد مشهد و 2 مورد اسفراين) 2 مـــورد بوشهر، 3 مورد سمــنان(كانون آلودگي دامغان) و 1 مورد از قم) پس از انجام تهيه لام مستقيم، نمونه برداري شد. از نمونه ها استخراج DNA انجام و واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) با استفاده ازژن ITS1 انجام شد. براي آزمايش طول قطعه محدوديتي (RFLP) از آنزيم Apo1 استفاده شد. يافته هاي پژوهش: نتايج PCR براي همه نمونه ها مثبت و باندهايي با اندازه 69-350 جفت باز را نشان داد. نتايج به دست آمده از RFLP نشان داد كه از بين نمونه هاي مورد مطـــالعه 33 نفر(94 درصد) ليــــشمانيا مــــاژور و 2 نفـــر(6 درصد) لشيمانيا تروپيكا مي باشد. در اين مطالعه بيشترين ميزان آلودگي در گروه هاي سني 19-10 سال و كمترين ميزان آلودگي در گروه هاي سني بالاي 50 سال ديده شد. بحث و نتيجه گيري: مطالعات نشان مي دهد كه ژنITS1 و آنزيمApo1 ژن و آنزيم مناسب براي تشخيص دو گونه ليشمانيا مــــاژور و ليشمانيا تروپيــــكا از هم مي باشد و روشPCR-RFLP يك روش مناسب براي تشخيص گونه هاي مولد ليشمانيوز جلدي است.