اثر افزودن مايع مني به اسپرم پوشش‌دار شده قوچ تالشي در حضور و عدم حضور زرده تخم مرغ

Effect of adding seminal plasma on coated sperm of Taleshi ram in the presence of egg yolk and without it

به منظور بررسي اثر وجود زرده تخم مرغ و افزودن مايع مني به اسپرم پوشش‌دارشده، مني از 4 راس قوچ نژاد تالشي به وسيله واژن مصنوعي جمع‌آوري شد. جهت پوشش‌داركردن اسپرم، مني در لوله حاوي تريس-فروكتوز15 % زرده تخم مرغ جمع‌آوري شد. نمونه‌ها بعد از ارزيابي اوليه، تجميع و سانتريفيوژ شدند. پس از حذف مايعفوقاني و رقيق‌سازي، نمونه‌ها به 3 قسمت مساوي تقسيم و به مدت 44 ساعت در °C4 نگهداري شدند. به منظور افزودن مايع مني سه روش (R، M وN) انجام شد.در روش R، نمونه سانتريفيوژ شده و مايعفوقاني برداشته شد. در روش M، نمونه سانتريفيوژ شده و دوباره با مايع رويي مخلوط شد. در روش N، هيچ عملي انجام نشد و نمونه‌ها در دماي °C4 نگهداري شدند. نمونه‌هاي به دست آمده از هر روش‌ به سه قسمت مساوي تقسيم شد و مقادير صفر، 10 و 20 درصد مايع مني به آن‌ها اضافه شد و نمونه ها در °C4 ذخيره شدند. تحرك پيش‌رونده، سلامت غشا پلاسمايي، زنده‌ماني اسپرم و سلامت غشا آكروزوم نمونه‌ها پس از 4 ساعت بررسي شدند. كمترين ميزان تحرك پيش‌رونده (83/10%) و زنده‌ماني اسپرم (58/57%) در روش R مشاهده شد (05/0 > P). سلامت غشاي پلاسمايي در روش N (5/63%) بيشتر از روش R (52%) بود (05/0 > P) و بين روش R يا N و M تفاوتي وجود نداشت. روش‌ها اثري بر سلامت غشاي آكروزوم نگذاشتند. بنابراين حذف زرده تخم مرغ از اسپرم پوشش‌دارشده بعد از ذخيره‌سازي مطلوب نيست.

In order to study the effect of the presence of egg yolk and adding seminal plasma to coated sperm, the semen were collected from 4 Taleshi rams by using artificial vagina. To coat the sperm, semen was collected within the tube containing Tris-fructose-15% egg yolk. After the initial evaluation, the samples are mixed and centrifuged. After removing supernatant and diluting, samples were divided into 3 equal parts; they were cooled to 4°C and incubated for 44 hours. Three methods (R, M and N) were performed to add seminal plasma. In R method, sample was centrifuged and supernatant were removed. In M method, sample was centrifuged and mixed with the supernatant. In N method, nothing was done and sample was kept at 4°C. Sample, which obtained from each method, was split into three equal parts after that the amount of zero, 10 and 20% seminal plasma were added and aliquots incubated at 4°C. Sperm motility, functional membrane integrity, viability and acrosome integrity were estimated after 4 hours. The lowest of sperm motility (10.83%) and viability (57.58%) were observed by R method (P < 0.05). The functional membrane integrity was higher in N method (61.33%) than R method (52%; P < 0.05) and there was no difference between R method or N method and M method. The methods did not effect on the acrosome integrity. Therefore, removing egg yolk was not useful for coated ram spermatozoa after storage at 4°C.