پديد آورندگان :
آغبلايي، امير اعلا نويسنده Associate Professor, Department of Oral and Maxillofacial Pathology , School of Dentistry, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran Aghbali, Amir ala , وثوق حسيني، سپيده نويسنده Professor, Department of Oral and Maxillofacial Pathology , School of Dentistry, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran. Vosough Hosseini, Sepideh , برادران، بهناز نويسنده Assistant Professor, Department of Medical Immunology, Immunology of Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran Baradaran, Behzad , كلباسي كروندي ، نادر نويسنده Postgraduate Student, Department of Oral and Maxillofacial Pathology, School of Dentistry, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran. Kalbasi Gharavi, Nader , بنده حق ، علي نويسنده Assistant Professor, Department of Biotechnology, School of Agriculture, Tabriz University, Tabriz, Iran Bandehagh, Ali , جليلي ، اكبر نويسنده Expert in Laboratory, Research Center of Immunology, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran. Jalili, Akbar
كليدواژه :
آپوپتوز , اسكواموس سل كارسينوما , دانه انگور سياه , سميت سلولي
چكيده فارسي :
چكيده
مقدمه: دانه انگور سياه حاوي تركيبات فعالي مانند آنتي‌سيانين، پروآنتوسيانيدين و پروسيانيدين مي‌باشد. مطالعه‌ي حاضر با هدف ارزيابي اثر سميت سلولي عصاره هيدرومتانولي دانه انگور سياه بر روي سلول‌هاي سرطاني KB و القاي آپوپتوز بر روي آن‌ها انجام گرديد.
مواد و روش‌ها: در مطالعه‌ي تجربي حاضر از دانه انگور به كمك حلال هيدرومتانولي90 درصد، عصاره‌گيري شد. سلول‌هاي سرطاني KB در محيط كشت با غلظت‌هاي مختلف عصاره تيمار شدند و در زمان 24 ساعت اثر سميت سلولي آن‌ها با استفاده از روش (MTT) Micro-culture tetrazolium test بررسي شد. جهت بررسي القاي آپوپتوز، تست الايزا در طي 24 ساعت انجام پذيرفت. داده‌ها در نرم‌افزار آماري SPSS نسخه 20، با آزمون يك‌طرفه ANOVA مورد آناليز قرار گرفت (05/0 = ?).
يافته‌ها: نتايج حاصل از بررسي اثر سميت سلولي عصاره هيدرومتانولي دانه انگور سياه بر روي قابليت زيست‌سازگاري سلول‌هاي سرطاني KB در طي 24 ساعت نشان داد كه عصاره هيدرومتانولي در همه غلظت‌هاي بررسي شده توسط تستMTT، اختلاف معني‌دار
(046/0 = p value) با گروه كنترل داشته و توانايي مهار رشد و خاصيت سميت سلولي بر سلول‌هاي سرطاني KB را دارد و پس از 24 ساعت موجب مهار رشد سلول‌هاي سرطاني KB با (Inhibition cencentration 50) IC50 370/417 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر شد. تست الايزا در طي 24 ساعت نشان داد كه عصاره هيدرومتانولي، 68 درصد مرگ سلولي آپوپتوز را القا مي‌كند. با بررسي مورفولوژي سلول‌ها تغييرات عمده آپوپتوزي مشاهده شد و مرگ سلولي گروه تحت تاثير عصاره، معني‌دار (002/0 = p value) بود.
نتيجه‌‌گيري: با توجه به محدوديت‌هاي اين مطالعه، عصاره هيدرومتانولي دانه انگور سياه، توانايي مهار رشد و خاصيت سميت سلولي بر سلول‌هاي سرطاني KB را دارد و سبب القاي آپوپتوز در اين رده سلولي KB مي‌گردد. به‌نظر مي‌رسد عصاره هيدرومتانولي دانه انگور كانديد مناسبي جهت استخراج و خالص سازي تركيبات فعال باشد.
كليد واژه‌ها: دانه انگور سياه، سميت سلولي، آپوپتوز، اسكواموس سل كارسينوما
چكيده لاتين :
Introduction: The grape seed is rich in anthocyanin, proanthocyanidins, procyanidins. The present investigation was carried out to study cytotoxic effects of hydromethanolic extract of grape seed on oral squamous cell carcinoma KB cell line and induction of apoptosis in these cells.
Materials and methods: In the present experimental study grape seeds were extracted with 90% hydromethanolic solvent. Then KB cells were treated with different concentrations of crude extract. The cytotoxicity was measured using the MTT (Micro-culture tetrazolium test) assay in 24 hours. ELISA assay was used to measure induction of apoptosis after 24 hours. Data was analyzed with SPSS 20 and one-way ANOVA (?=0.05).
Results: Data from MTT revealed that hydromethanolic crude extract of grape seed had growth inhibitory and cytotoxic activity on KB cell line in (IC50 = 417.370 ??g/mL) after 24 hours. In ELISA assay apoptosis cell death rate was determined to be about 68% after 24 hours. Cell morphology alteration analysis showed major apoptosis changes and the extract resulted in significant cell death in the treated group (p value = 0.002).
Conclusion: Under the limitations of the present study, crude grape seed extract had an inhibitory effect on the growth of neoplastic KB cell line, inducing apoptosis in these cells. Grape seed extract appears to be an appropriate candidate for identification and purification of its active compounds.
Key words: Apoptosis, Cytotoxicity, Grape seed extract, Squamous cell carcinoma
