بررسي فراواني ژن هاي چسبندگي cna، fnbA و fnbB در جدايه هاي استافيلوكوكوس اوريوس جدا شده از موارد تورم پستان گوسفند

Frequency analysis of adhesin genes cna, fnbA and fnbB in Staphylococcus aureus isolates from sheep mastitis

عوامل حدت مختلفي در بيماري زايي استافيلوكوكوس اوريوس نقش دارند. پروتيين هاي سطحي مثل پروتيين هاي متصل شونده به كلاژن (Cna) و پروتيين هاي متصل شونده به فيبرونكتين (FnBP) از عوامل مهم در اتصال و تهاجم استافيلوكوكوس اوريوس مي باشند. از اين رو، هدف از اين مطالعه بررسي حضور ژن هاي cna fnbA, و fnbB در بين جدايه هاي استافيلوكوكوس اوريوس به دست آمده از موارد تورم پستان باليني و تحت باليني در گوسفند بود. در اين مطالعه 45 جدايه بوسيله آزمايش هاي بيوشيميايي استاندارد و نيز تكثير ژن ترمونوكلياز اختصاصي گونه (nuc) به عنوان استافيلوكوكوس اوريوس شناسايي شدند. سپس جدايه ها از نظر حضور ژن هاي چسبندگي cna، fnbA و fnbB با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي مربوط به هر ژن و با به كار گيري روش واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) مورد آناليز قرار گرفتند. به دنبال استفاده از پرايمرهاي مختص ژن اختصاصي گونه (nuc)، قطعه اي به اندازه 279 جفت باز از تمامي جدايه هاي استافيلوكوكوس اوريوس تكثير يافت. جالب اين كه تعداد 43 مورد از جدايه ها (55/95%) از نظر داشتن ژن cna مثبت بودند. به علاوه، از بين 45 جدايه مورد مطالعه 39 و 35 جدايه به ترتيب حامل ژن‌هاي fnbA و fnbB بودند. با توجه به انتشار وسيع هر سه ژن cna، fnbA و fnbB در بين جدايه هاي مورد مطالعه مي توان عنوان نمود كه CBP، FnBPA و FnBPB كد شده توسط ژن هاي مذكور احتمالاً در بيماري-زايي تورم پستان ناشي از استافيلوكوكوس اوريوس موثر بوده و جدايه ها احتمالاً گيرنده‌هايي براي پروتيين هاي ماتريكس مثل كلاژن و فيبرونكتين بيان مي‌نمايند. اين موضوع توسعه راهكارهاي نوين جهت پيشگيري از تورم پستان را بر اساس ليگاندهاي آنتاگونيست ترغيب مي نمايد كه مي توانند با عوامل چسبندگي سطحي بر هم كنش داده و اتصال اختصاصي آن را با پروتيين هاي ماتريكس بلوكه نمايد.

Different virulence factors are involved in Staphylococcus aureus pathogenesis. Surface proteins such as collagen- (cna) and fibronectin-binding proteins (fnB) are important factors in adhesion and invasion of S. aureus. Therefore, the aim of this study was to investigate the presence of cna, fnbA and fnbB genes in collection of S. aureus isolates from clinical and subclinical sheep mastitis. In this study 45 isolates were identified as S. aureus by standard biochemical as well as amplification of species-specific thermonucleasegene (nuc). Then, isolates were analyzed for the presence of cna, fnbA and fbnBadhesion genes using specific primers by polymerase chain reaction (PCR). A 279-bp DNA fragment was synthesized from all of the S. aureus isolates following the amplification of species-specific gene (nuc). Interestingly, 43 (95.55%) isolates were found to be cna positive. From the 45 studied isolates, 39 and 35 were harbored the fnbA and fbnB genes, respectively. According to the large diffusion of cna, fnbAand fbnB genes among the studied isolates, it can be conclude that CBP, FnBPA and FnBPB encoded by the mentioned genes were presumably effective in pathogenesis of mastitis caused by S. aureus and isolates likely express receptors for matrix proteins such as collagen and fibronectin. This encourages the development of new strategies to prevent mastitis, based on antagonist ligands able to interact with surface adhesions and block it specific binding with matrix proteins.