بررسي تجزيه‌زيستي هيدروكربن‌هاي نفتي گازوييل، تولوين و فنانترن توسط سه گونه باكتري

CHAO Pseudomonas fluorescens، Pseudomonas putida P13 و P5 Pantoea agglomerans

آلودگي خاك و آب به آلاينده‌هاي نفتي يكي از معضلات محيط زيست به شمار مي‌رود. زيست‌پالايي يكي از روش هاي برطرف‌سازي اين آلاينده‌ها است كه متكي بر ميكروارگانيسم هاي بومي و غيربومي مي باشد. با توجه به نقش مثبت باكتري‌هاي جنس سودوموناس در زيست‌پالايي، در اين مطالعه توانايي دو گونه باكتري بومي و غيربومي از جنس سودوموناس به ترتيب به نام‌هاي Pseudomonas putida P13، Pseudomonas fluorescens CHAO و يك گونه غير سودوموناس به نام Pantoea agglomerans P5 به عنوان باكتري‌هاي استفاده‌كننده از هيدروكربن‌ها در حضور مواد نفتي مختلف از قبيل گازوييل (2 درصد)، تولوين (1 درصد) و فنانترن (05/0 درصد) برآورد شد. آزمايش به صورت فاكتوريل در قالب طرح كاملاً تصادفي در سه تكرار با بكارگيري مايه تلقيح ميكروبي (با جمعيت CFU/ml 108) در هر دو محيط مايع و جامد انجام پذيرفت. براي اين منظور از محيط حداقل عاري از كربن (CFMM) و جايگزين نمودن مواد نفتي مختلف به عنوان منبع كربن استفاده شد. بررسي توانايي باكتري‌ها در محيط جامد بر اساس سنجش قطر كلني و در محيط مايع بر اساس كدورت سنجي و شمارش جمعيت باكتري‌ها انجام پذيرفت. نتايج نشان داد كه بيشترين رشد و تجزيه مواد نفتي توسط باكتري‌هاي جنس سودوموناس اتفاق مي‌افتد و هر دو گونه سودوموناس رفتار و رشد يكساني را در حضور هر سه ماده نفتي نشان دادند در حالي كه گونه Pantoea agglomerans P5 كمترين رشد را داشت. از ميان مواد نفتي استفاده شده بالاترين تجزيه مربوط به ماده نفتي گازوييل و به دنبال آن به ترتيب فنانترن و تولوين بود. همچنين توانايي باكتري‌ها در تجزيه مواد نفتي با گذشت مدت زمان انكوباسيون افزايش يافت. نتايج اين آزمايش توانايي گونه‌هاي سودوموناس را در زيست‌پالايي محيط‌هاي آلوده شده به هيدروكربن‌ها به ويژه هيدروكربن‌هاي آليفاتيك نشان داد.

Soil and water contamination by oil is one of the great environmental concerns. Bioremediation is one of principal strategies for remediation, wherein the pollutants can be removed by use of microorganism or any biological process that uses native or exogenous microorganisms. According to the positive role of Pseudomonas genus in bioremediation, in this study the potential of two Pseudomonad bacteria, including Peudomonas fluorescens CHAO, P. putida P13 and a non-Pseudomonad Pantoea agglomerans as hydrocarbon utilizing bacteria were estimated in presence of three compounds including gas oil (2%), toluene (1%) and phenanthrene (0.05%). Bacterial inoculum containing 108 cfu/ml was used in plate and liquid assays, which were performed in factorial experiment based on completely randomized design with three replications. Results showed that in CFMM plate assay, diameter of colony is not affected by any of bacterial isolates and compounds. In broth assay, P. putida P13 and P. fluorescence CHAO had similar behavior in the presence of Gas oil, toluene and phenanthrene and trend of bacterial growth was the same at different times, while with P. agglomerans P5 the lowest number of bacteria was achieved. Among three compounds the highest degradability was recorded to the gas oil, followed by phenanthrene and toluene. The ability of bacteria in degradation of oil-compounds increased by increasing time of incubation. To conclude, this study suggests the potential use of two Pseudomonas isolates for bioremediation of hydrocarbon-contaminated environments especially with aliphatic hydrocarbon.