تشخيص مولكولي ژن‌هاي بتالاكتامازي blaCTX-M، blaTEM، blaSHV و بررسي الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي در ايزوله‌هاي كلبسيلا پنومونيه جدا شده از نمونه‌هاي باليني در بخش مراقبت‌هاي ويژه بيمارستان نمازي شيراز

Molecular Identification of SHV,TEM, CTX-M B lactamases Genes and Antibiotics Resistance Pattern of k.pneumoniae Isolates Collected from ICU Patients of Namazi Hospital, Shiraz, Iran

چكيده زمينه و هدف: باكتري‌هاي مولد بتالاكتامازهاي طيف گسترده، به طور وسيعي در سراسر جهان گسترش يافته‌اند. توليد اين آنزيم‌ها سبب ايجاد مقاومت باكتري‌ها نسبت به طيف وسيعي از آنتي‌بيوتيك‌ها مي شود كه منجر به محدود شدن راه‌هاي كنترل عفونت و گزينه هاي درماني صحيح شده است. هدف اين مطالعه بررسي حساسيت آنتي‌بيوتيكي نسبت به آنتي‌بيوتيك‌هاي بتالاكتام و تحقيق پيرامون وجود ژن‌هاي بتالاكتامازيSHV،TEM،CTX-M، درنمونه‌هاي باليني كلبسيلاپنومونيه جداشده از بخش مراقبت‌هاي ويژه بيمارستان نمازي شيراز بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي حساسيت باكتري‌هاي جدا شده نسبت به 10 آنتي‌بيوتيك با روش انتشار ديسك بر اساس دستورالعمل CLSI تعيين شده و سويه‌ها با روش سينرژي دو ديسك از نظر وجود آنزيم‌هاي بتالاكتاماز طيف گسترده بررسي شدند و حداقل غلظت بازدارندگي نسبت به آنتي‌بيوتيك سفوتاكسيم با استفاده از نوارهاي E.test تعيين شد. ژن‌هاي SHV، TEM،CTX-M، در ايزوله‌ها با روش مالتي پلكسPCR شناسايي و تعدادي از آنها نيز تعيين توالي شد. داده‌ها با آزمون آماري مجذور كاي تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: بيشترين درصد مقاومت نسبت به آمپي‌سيلين 100 درصد و ميزان حساسيت ايزوله‌ها به ايمي پنم 66/1 درصد بود. در اين مطالعه60 درصد سويه‌ها مولد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف بودند. ژن TEM در 34/38 درصد و هرسه ژن TEM و CTX و SHV در 33/13 درصد ايزوله‌ها يافت شدند. نتيجه‌گيري: مطالعه حاضر حاكي از آن است كه كلبسيلاپنومونيه مولد آنزيم‌هاي بتالاكتاماز و در بيماران بستري در بخش مراقبت‌هاي ويژه از شيوع بالايي برخوردار است.

Background and aim: B-lactamase enzymes producing bacteria ESBL have spread widely throughout the world. The production of enzymes induces bacterial resistance to a wide range of antibiotics which is leading to the limitation of infection control and correct treatment. The aim of the present study was to investigate patterns of antibiotic susceptibility to antibiotics and the presence of B-lactamase genes SHV, TEM, CTX-M, in Klebsiella pneumoniae isolates from clinical specimens of intensive care. Methods: Susceptibility of isolated bacteria against 10 antibiotics was determined by agar disk diffusion method according to the CLSI guidelines. The strains (DDST) were examined for the presence of the spectrum B-lactamase enzymes. Using E-test, the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antibiotic was determined to cefotaxime. Moreover, SHV, TEM, CTX-M genes were identified by, Multiplex PCR method, and some of them were sequenced. Results: The antibiotic resistance against 10 antibiotics was determined. The highest percentage of isolates was resistant to ampicillin (100%) and sensitivity to imipenem was 1.66%). In this study, the majority of strains produced ESBL (60%). TEM gene in 34.38% and all three genes (TEM and SHV and CTX) at 33.13% of isolates were observed. Conclusion: The present study showed that the K. pneumoniae producing ESBL in patients in ICU are common. Therefore, the use of procedures and policies for infection control in hospitals and especially ICU is necessary. Key words: Klebsiella pneumoniae, ESBL, Multiplex PCR, antibiotic sensitivity