بررسي مقاومت دارويي نماتودهاي دستگاه گوارش گوسفند با استفاده از آزمايش رشد نوزاد

A survey on drug resistance in gastrointestinal nematodes of sheep using larval development assay

در اين مطالعه وجود مقاومت در نماتودهاي دستگاه گوارش گوسفند نسبت به لواميزول و آلبندازول در 15 گله مورد بررسي قرار گرفت. در هر گله از تعداد 20 راس دام نمونه مدفوع تهيه و تخم نماتودهاي موجود در اين نمونه‌ها به روش شناورسازي جدا گرديد و در ميكروپليت ريخته شد. پس از خروج نوزادها از تخم، به چاهك‌هاي داراي نوزادهاي نماتود محيط مغذي، باكتري اشريشيا كولي و رقت‌هاي بين 008/0 تا 8 ميكروگرم در ميلي‌ليتر يكي از داروهاي ضد كرمي لواميزول يا آلبندازول اضافه شد. به منظور تعيين تلفات ناشي از ساير عوامل حفره‌هاي رديف اول هر ميكروپليت به عنوان كنترل در نظر گرفته شد و به آنها دارو اضافه نگرديد. سپس ميكروپليت به مدت 6 روز ديگر در انكوباتور cْ 25 قرار داده شد. نتايج اين آزمايش در گله‌هاي مورد مطالعه نشان داد كه LD50 لواميزول بين 021/0 تا 270/0 ميكروگرم در ميلي‌ليتر وLD50 آلبندازول بين 018/0 تا 130/0 ميكروگرم در ميلي‌ليتر متغير مي‌باشد. هچنين پارامتر رشد نوزاد در نمونه‌هاي كنترل منفي كه فاقد داروي ضد كرمي بودند 65% تعيين گرديد و نوزادهاي مرحله سه موجود در اين نمونه‌ها عمدتا شامل استرتاژيا(59%)، تريكوسترونژيلوس (20%) و همونكوس (21%) بودند، در صورتي كه در كنترل مثبت تنها جنس استرتاژيا مشاهده گرديد. بنابرين مي‌توان نتيجه‌گيري نمود كه كاهش اثر اين داروها احتمالا ناشي از ايجاد جدايه‌هاي مقاوم استرتاژيا مي‌باشد.

In this survey, resistance in gastrointestinal nematodes of sheep to levamisole and albendazole were investigated in 15 sheep flocks. On each flock, faecal samples were taken from 20 randomly selected sheep. Nematode eggs were separated from the samples and placed in microplate for 24 hours at 25ْc to hatch and then Nutritive media, Escherichia coli and different concentrations of levamisole or albendazole were added to first stage larvae and incubated at 25ْc for 6 more days. LD50 of these drugs in each flock were calculated according to precentage of larval development parameter in different concentration of levamisole or albendazole (0.008 to 8 µg/ml). To control the effects of other factors, none of the drugs was added to the first row of wells. Results of this survey showed that LD50 of levamisole were varied between 0.021 to 0.27?g/ml and LD50 of albendazole between 0.018 to 0.13?g/ml . In negative control samples with no anthelmintic, average larval development was 65% and third stage larvae were mostly composed of Ostertagia (59%), Trichostrongylus (20%) and Haemonchus (21%) but in positive contol samples with the highest concentration of the drugs, only Ostertagia spp was detected. Therefore, we can conclude that efficacy of levamisole and albendazole in some of the flocks, were significantly reduced and development of resistant isolates of Ostertagia is the cause of this reduction.