بررسي جراحات هيستوپاتولوژيك و رديابي آنتي‌ژن ويروسي در ماكيان گوشتي تلقيح شده با ويروس آنفلوانزاي طيور تحت تيپ (H9N2)

Histopathologic lesions survey and antigen detection in broiler chickens inoculated with a H9N2 avian influenza virus

اگرچه ويروس آنفلوانزاي طيور تحت تيپ (H9N2) جز پاتوتيپ با بيماريزايي كم طبقه‌بندي شده است، ولي علاوه بر ايجاد خسارات اقتصادي زياد در صنعت طيور كشورهاي منطقه خاورميانه، از نظر بهداشت عمومي نيز داراي اهميت مي‌باشد. هدف از اين تحقيق، بررسي پاتوژنز ويروس آنفلوانزا جدايه A/Chicken/Iran/SH-110/99(H9N2) در ماكيان گوشتي به دنبال تلقيح داخل بيني ويروس، بررسي نوع، شدت و فراواني جراحات بافتي و رديابي آنتيژن ويروس در بافت‌هاي مختلف بدن پرنده است. در اين مطالعه تعداد 50 قطعه جوجه گوشتي يك روزه راس انتخاب شده و بطور مساوي در دو گروه (تيمار و كنترل) تقسيم و در مراحل مختلف آزمايش جهت بررسي پادتن اختصاصي تحت تيپ (H9N2) از آنها خون‌گيري به عمل آمد. سپس 18 قطعه از جوجه‌ها (گروه تيمار) در سن 20 روزگي با اين جدايه از ويروس به روش داخل بيني با دوزي معادل EID50106 به ازاي هر پرنده تلقيح گرديدند. 18 قطعه ديگر، به عنوان كنترل در نظر گرفته و سپس در روز تلقيح و روزهاي 1، 3، 5، 7 و 10 پس از تلقيح ويروس، هر بار 3 قطعه جوجه از هر گروه بصورت اتفاقي انتخاب گرديده، آسان‌كشي و كالبدگشايي گرديدند. ضايعات عمومي لاشه‌ها ثبت و اقدام به نمونه‌برداري از بافت‌هاي مختلف (كبد، ريه، تيموس، طحال، كليه، مغز، پانكراس، ناي، بورس فابريسيوس و دوازدهه) جهت انجام مطالعات هيستوپاتولوژي و ايمونوفلورسانس گرديد. نتايج حاصله نشان داد كه جدايه A/Chicken/Iran/SH-110/99(H9N2) ويروس آنفلوانزا در ماكيان ويژگي اپي‌تليوتروپيك دارد بطوريكه در تلقيح داخل بيني، ويروس در بافت‌هاي ناي، ريه و كليه، ضايعات اختصاصي به صورت تراكييت، پنوموني و نفريت ايجاد كرد و حضور ويروس در اين بافت‌ها، با بكارگيري تكنيك ايمونوفلورسانس غير مستقيم به اثبات رسيد به عبارتي ويروس ويژگي پنوموتروپيك و نفروتروپيك از خود نشان داد.

Avian influenza virus subtype (H9N2) which has been pathotyped as non-highly pathogenic not only caused great economic losses in broiler farms in Middle East countries, but also it has some public health significance as well. The purposes of this experiment were to determine the effect of intranasal inoculation of Iranian AIV (H9N2) isolate on pathogenesis in broiler chickens to demonstrate the type, severity and frequency of histologic changes produced in broiler chickens following intranasal inoculation of the isolate and to show H9N2 AI viral antigen distribution in different tissues of chickens. Thirty six 1-day-old broiler chickns (Ross, UK) were randomly divided in two equal groups (treatment and control) and were bled at certain time points for detection of specific antibodies against H9N2 subtype of AIV. At 20 days of age the treatment group was inoculated intranasally with 106 EID50 per bird of A/Chicken/Iran/SH-110/99(H9N2) avian influenza virus. Three birds from each group (treatment and control) were randomly selected on days 0, 1, 3, 5, 7 and 10 post-inoculation (PI). Then they were humanly sacrificed and were subjected throughout necropsy. Gross lesions were recorded and tissue samples from different organs (trachea, lung, liver, pancreas, spleen, thymus, duodenum, kidney, brain and bursa of fabricius) were collected for histopathology and immunofluorescence studies. The results indicated that the A/Chicken/Iran/SH-110/99(H9N2) avian influenza virus is epitheliotropic in chickens. In intranasal inoculation, tracheitis, pneumonia and tubulointerstitial nephritis were the most frequent histologic lesions. The AIV antigen was detected in the trachea, lung (pneumotropic) and kidney (nephrotropic) of inoculated chickens using indirect immunofluorescence technique.