تعيين چندشكلي ژن FecB در گوسفندان لري - بختياري و عربي استان خوزستان با استفاده از روش PCR-RFLP

Determining of Polymorphism of FecB gene in Lory-Bakhteyarian and Arabian sheep of Khouzestnian province by PCR-RFLP

استفاده از ماركرهاي ملكولي يكي از بهترين روش هاي ارزيابي ژنتيكي جمعيت هاي دامي است. بررسي ها نشان مي دهد كه ژن بورولا يكي از ژن هاي بزرگ و تاثيرگذار بر ميزان تخمك گذاري و چندقلوزايي است. در اين مطالعه از 125 راس گوسفند با سابقه چندقلوزايي (80 راس لري - بختياري و 45 راس عربي) خونگيري به عمل آمد و DNA آنها با روش اصلاح شده نمكي استخراج و با استفاده از اسپكتروفوتومتر و ژل آگارز ارزيابي گرديدند. جايگاه جهش ژن FecB با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي تكثير يافت و محصولات به دست آمده (190 جفت باز) به وسيله ي ژل آگارز بررسي گرديدند. پس از هضم محصولات PCR با آنزيم AvaII جمعيت مورد مطالعه از نظر چندشكلي بررسي گرديدند. در صورتي كه حامل هموزيگوس در گله باشد باندهاي 160 جفت بازي و 30 جفت بازي مشاهده مي شود ولي اگر حامل ژن در گله نباشد باندها فقط 190 جفت بازي خواهند بود درحالي كه حامل هتروزيگوت در گله باشد باندهاي 190، 160 و 30 جفت بازي مشاهده خواهد شد. نتايج نشان مي دهد كه تنها باندهاي 190 جفت بازي در گله هاي مورد مطالعه مشاهده مي شود، بنابراين چند شكلي ژن FecB در گوسفندان استان خوزستان وجود ندارد و تنها آلل نوع وحشي و همه نمونه ها داراي ژنوتيپ ++ مي باشند. در نتيجه عامل چندقلوزايي در گوسفندان استان خوزستان نمي تواند ژن FecB باشد و مطالعات گسترد ه تري براي ارزيابي ژن‌هاي موثر بر چندقلوزايي و تعيين ژنوتيپ اين گوسفندان نياز مي باشد.

Using genetical markers is one of the best methods to evaluate animal improvement. It is reported that Booroola gene has additive for litter size and ovulation rate in sheep. In this study 125 blood samples were collected from Lory-Bakhteyarian (80 sheep) and Arabian sheep (45 sheep). DNA of blood samples was extracted by modified salting out method. The DNA was evaluated by spectrophotometer and agarose gel. Site of mutation was amplified using specific primers and PCR product (190 bp bands) was determined by agarose gel electrophoresis, and then the products PCR were digested with AvaII enzyme. The homozygous carrier sheep with FecB mutation (BB) had a 160 bp and 30 bp bands, the noncarriers (++) had a 190 bp bands, whereas heterozygotes (B+) had 160, 30 and 190 bp bands. Results show no polymorphism for FecB gene in khozestanian sheep. All of the sheep were wild type (++), so mutation of FecB gene was not the cause of prolificacy in Khozestanian sheep. Further research is required to evaluate fecundity gene and genotyping of Khozestanian sheep.