تاثيرsICAM-1 بر اكسيداسيون كلسترول ـ LDL و كلسترول ـ HDL و فعاليت آنزيم پاراكسوناز-1؛ در شرايط in vitro

The in Vitro Effect of sICAM-1 on Oxidation of LDL and HDL and Activity of Paraoxonase-1 Enzyme

مقدمه: ICAM-1 گليكوپروتييني است كه نقش محوري در التهاب و اتصال منوسيت‌ها و اندوتليوم ايفا مي‌نمايد. افزايش بيان آن در حضور كلسترول ـ LDL امكان تحريك سازوكارهاي آتروژني را از مسير اتصال ميان ليپوپروتيين و ICAM-1 مطرح مي‌سازد. پژوهش حاضر با هدف بررسي اين فرضيه، تاثيرICAM-1 را بر اكسيداسيون كلسترول ـ LDL و كلسترول ـ HDL و فعاليت آنزيم پاراكسوناز 1 مورد بررسي قرار داد. مواد و روش‌ها: كلسترول ـ LDL و كلسترول ـ HDL سرم با روش اولتراسانتريفيوژ جداسازي و غلظت‌هاي 25 و 100 ميكروگرم‌ پروتيين بر ميلي‌ليتر از آ‌ن‌ها در حضور غلظت‌هاي مختلف sICAM-1 (0، 2، 5 نانوگرم/ميلي‌ليتر) تحت استرس اكسيداتيو (5 ميكرومولار مس) قرار گرفتند و كينتيك مربوط به تشكيل دي ان كنژوگه با اسپكتروفوتومتر، و تحرك الكتروفورتيك ليپوپروتيين‌هاي انكوبه با sICAM-1 با روش الكتروفورز تعيين شد. هم‌چنين، فعاليت آنزيم پاراكسوناز 1 در حضور غلظت‌هاي مختلف sICAM-1 سنجش گرديد. يافته‌ها: ماكزيمم سرعت اكسيداسيون كلسترول ـ LDL در حضور غلظت‌هاي مختلف sICAM-1افزايش نشان داد (05/0P < ) و تحرك الكتروفورتيك كلسترول ـ LDL در مجاورت sICAM-1 كاسته شد (%25 كاهش داشت). فعاليت سرم پاراكسونازي آنزيم PON-1 در حضور غلظت‌هاي مختلف sICAM-1 به ترتيب افزايش، و سپس كاهش معني‌داري يافت (05/0P < ). نتيجه‌گيري: يافته‌ها نشان داد sICAM-1 در غلظت‌هاي بالاتر از 2 نانوگرم بر ميلي‌ليتر بر برخي شاخص‌هاي كينتيكي اكسيداسيون يعني ماكزيمم سرعت اكسيداسيون كلسترول ـ LDL و نيز فعاليت آنزيم PON-1 تاثيرگذار مي‌باشد و ممكن است از اين راه نقشي در فرايند آتروژنز داشته باشد. پژوهش حاضر در كل از فرضيه‌ي دخالت ICAM-1 در فرايند آتروژنز از راه ارتباط مستقيم با ليپوپروتيين‌ها پشتيباني مي‌كند.

Introduction: The intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) plays a pivotal role in inflammation and linkage between monocytes and endothelium. LDL-induced ICAM-1 expression may include the possibility of an atherogenic stimulation due to a binding between lipoprotein and ICAM-1. To evaluate of this hypothesis, the present study investigated the effect of sICAM-1 on susceptibility of LDL and HDL to oxidation and Paraoxonase-1 (PON-1) activity. Materials and Methods: LDL and HDL were purified from serum via ultracentrifugation and 25 and 100 µg-protein/ml of LDL and HDL, in the presence of sICAM-1 (0, 2, 5 ng/ml), were exposed to oxidative stress (5 µM copper) and assayed through monitoring of formation of conjugated dienes using a spectrophotometer. Electrophoresis was performed to determine the mobility of incubated-lipoproteins with sICAM-1. The activity of PON-1 was assayed in the presence of of sICAM-1. Results: In presence of different concentrations of sICAM-1, Vmax increased significantly (P < 0.05), while electrophoretic mobility of LDL decreased (? 25%). PON-1 activity increased at low levels of sICAM-1 but decreased at higher levels (P < 0.05; P < 0.005). Conclusion: The results indicate that sICAM-1 in dosages over than 2 ng/ml affects some kinetical parameters of LDL oxidation and PON-1 activity that can be interpreted as a positive stimulus in atherogenesis. Overall the results may support the hypothesis of a lipoprotein-mediated role for ICAM-1 in atherogenesis. of lipoprotein