غربالگري پلي مرفيسم هاي جديد زيرواحد1 ژن آنزيم سيتوكروم اكسيداز ميتوكندريايي در بيماران مبتلا به انسداد مزمن ريوي

Screening of new polymorphisms of subunit 1 of cytochrome oxidase gene in COPD patients

سابقه و هدف: بيماري انسداد مزمن ريوي(COPD) از التهاب و تخريب بخشهايي از بافت ريه به وجود مي آيد و معمولاً افراد را در سنين بالاي 50 سال مبتلا مي نمايد. . با توجه به اينكه مشكل اصلي اين بيماران ضعف در انجام كارهاي فيزيكي به دليل بروز تنگي نفس و كمبود انرژي است اين سوال مطرح مي شود كه آيا تغيييرات در آنزيم سيتوكروم اكسيداز(COX) به عنوان آخرين و مهمترين جز زنجيره تنفسي مي تواند در بروز اين بيماري دخيل باشد. در همين راستا 65 بيمار COPD با ميانگين سني 8 ± 71 و 50 فرد سالم با ميانگين سني4±56 انتخاب شده و از DNA تخليص شده از نمونه خون آنها براي انجام اين تحقيق استفاده شد. مواد و روش ها: DNAهاي جدا شده براي تكثير زيرواحد يك ميتوكندريايي آنزيم COX مورد استفاده قرار گرفت. در اين تحقيق غربالگري 4 پلي مرفيسم با استفاده از روش جديد ARMS Real time PCR در قطعه COXI انجام شد. يافته ها: بعد از انجام PCR، نتايج بدست آمده در دو گروه بيمار و سالم جهت تعيين درصد پلي مرفيسم در آنها مورد بررسي قرار گرفتند. نتايج نشان دهنده اختلاف قابل ملاحظه ميزان پلي مرفيسم ها بين دو گروه مبتلا به COPD و گروه سالم بود. نتيجه گيري: بيشترين اختلاف ميزان پلي مرفيسم در دو گروه بيمار و سالم در نوكلوتيد 6060 بود كه تنها پلي مرفيسم منجر به تغيير اسيد آمينه است. افزايش مقدار اين پلي مرفيسم ها در افراد مبتلا به COPD نسبت به افراد نرمال ميتواند اين پلي مرفيسم ها را به عنوان يكي از عوامل دخيل در ابتلا به COPD معرفي كند.

Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD) is caused by inflammation and destruction of a part of lung and usually appears after age 50. Considering the muscle weakness, energy limitation and problem with oxygen consumption in COPD patients, we analyzed the mitochondrial cytochrome c oxidase (COX) gene to find the relationship between COXI and COPD disease. We studied 65 patients (71±8 years old) who were clinically stable and 50 healthy people (56±4 years old) as a control group. DNA was extracted and prepared according to the standards. Material and method Isolated DNA was used for amplification of COXI gene. In this study, screening four new polymorphisms using ARMS Real time PCR was performed in COXI. Results PCR conditions were optimized empirically for screening 4 polymorphisms by ARMS Real time PCR. Significant difference polymorphisms between COPD patient and normal control was found. Conclusion The light note of polymorphism was found at 6060 locus, which is the only polymorphism that leads to an amino acid change. Increasing the value of this polymorphism in patients with COPD than normal individuals can make this polymorphism a risk factor in COPD.