مهار رشد و القا آپوپتوز در رده سلولي K562 لوسمي ميلوييد انسان تحت تاثير مشتقاتي از خانواده دي هيدروپيرانو[c]كرومن

Growth inhibition and Induction of apoptosis in K562 Chronic Myeloid Leukaemia cells by the derivatives of dihydropyrano[c]chromenes family

زمينه: اخيراً اثرات ضد سرطاني تركيبات خانواده كرومن در چندين رده سلولي گزارش شده است. در مطالعه حاضر براي اولين بار اثرات ضدسرطاني مشتقاتي از خانواده دي هيدروپيرانوكرومن بر رده‌ي سلولي K562 به‌عنوان مدل آزمايشگاهي لوسمي ميلوييد مزمن (CML) مورد بررسي قرار گرفت. روش‌ها: پس از كشت 105 سلول K562 در ظروف 96 تايي، تحت تاثير مشتقات دي هيدروپيرانوكرومن در غلظت‌هاي 260-80 ميكرومولار و فواصل زماني 24، 48 و 72 ساعت قرار گرفت. از آزمون دفع رنگ تريپان بلو به‌منظور بررسي رشد و زيستايي در سلول‌هاي K562 استفاده شد. براي بررسي نوع مرگ سلولي از ميكروسكوپ فلورسنت و آزمون قطعه قطعه شدن DNA استفاده گرديد. يافته‌ها: مشتقات دي هيدروپيرانوكرومن باعث مهار رشد وابسته به غلظت و زمان در سلول‌هاي K562 گرديد، به‌طوري‌كه ميزان IC50 پس از 48 ساعت براي تركيبات 4-PC، 4-CNC و 4-HC به‌ترتيب 240، 180 و 160 ميكرومولار بود. تركيبات 4-CNC و 4-HC داراي گروه‌هاي الكترون كشنده CN و OH بر روي حلقه فنيل موقعيت C4 قدرت مهار رشدي بيشتري نسبت به تركيب مرجع 4-PC داشتند. همچنين داده‌هاي به‌دست‌آمده از مشاهدات ميكروسكوپ نوري و آزمون قطعه قطعه شدن DNA و ميكروسكوپ فلورسنت نشان‌دهنده وقوع آپوپتوز در سلول‌هاي K562 پس از 72 ساعت مي‌باشد. نتيجه‌گيري: با توجه به اثرات مهار رشدي و آپوپتوزي دي‌هيدروپيرانوكرومن‌ها بر سلول‌هاي K562، اين تركيبات مي‌توانند به‌عنوان كانديداي خوبي براي مطالعات بيشتر در درمان سرطان خون مورد بررسي قرار گيرند.

Background: Recently, the anticancer effect of Chromene derivatives in different cell types has been reported. In this study, we report some derivatives of dihydropyrano[c]chromenes with growth inhibitory and apoptotic activity against K562, Chronic Myeloid Leukaemia (CML). Methods: The cells were seeded in 96-well plates at 1×105 cells/well and treated with different concentrations of the dihydropyrano[c]chromenes (4-PC, 4-CNC and 4-HC). Growth inhibition and viability determined by trepan blue exclusion test. Apoptosis was also detected by fluorescent microscopy and DNA fragmentation assay. Results: The 4-PC, 4-CNC and 4-HC inhibited growth and viability of the cells in dose- and time-dependent manner. These compounds were found to be highly active growth inhibitor with IC50 of 240, 180 and 160 ?M, respectively. The results of Acridine orange/ethidium bromide (AO/EtBr) double staining also revealed that the compounds induced apoptosis at respective IC50 value after 72 h of treatment. Conclusion: As the effect of growth inhibition and induction of apoptosis in K562 Chronic Myeloid Leukaemia cells were observed, dihydropyrano[c]chromenes can be proposed as effective agents for more investigation in leukaemia treatment.